詳細介紹
商品介紹:
SH-4-54是一種有效的,未磷酸化的STAT3抑制劑,結合STAT3蛋白(KD=300nM)。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1456632-40-8 純度:98.0% 分子量:610.59 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
SH-4-54 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
大腸埃希菌G蛋白偶聯嘌呤受體p2y12抗體Anti-CFP Antibody淀粉樣前體蛋白(APP)
糙皮側耳G蛋白偶聯嘌呤受體p2y8抗體Anti-CHAT Antibody次級淋巴組織趨化因子6Ckine(CCL21)
黑曲霉G蛋白偶聯嘌呤受體p2y9抗體Anti-CGRPR(CALCRL) Antibody成纖維生長因子9(FGF9)
松球殼孢菌蛋白酪磷相互作用蛋白51抗體Anti-CHAT Antibody成纖維生長因子23(FGF-23)
黑根霉菌內皮纖溶原激活抑制蛋白1抗體Anti-CHAT Antibody成纖維生長因子23(FGF23)
盤長孢狀盤孢前列腺相關P抗原家族成員1抗體Anti-CHAT Antibody層粘連蛋白(Laminin)
香蕉生假絲酵母磷化酪抗體Anti-CHAT Antibody層連蛋白(Laminin)
果生鏈核盤菌豬藍耳病病M蛋白抗體Anti-CHD2 Antibody表皮生長因子受體2(sp185/Her2)
長谷川赤擔孢酵母橋粒斑菲蛋白1抗體Anti-CHD2 Antibody表皮生長因子受體2(Her2)
地錘菌屬突觸樣蛋白1抗體Anti-CHEK2 Antibody表皮生長因子受體(EGFR/ErbB1)
紅曲霉蛋白調解因子6抗體Anti-CHEK1 Antibody表皮生長因子受體(EGF-R)
樟疫霉神經叢蛋白B3抗體Anti-CHGA Antibody表皮生長因子受體(EGFR)
阿舒假囊酵母PHD指蛋白21A抗體Anti-CHEK2 Antibody半乳糖凝集3(Galectin-3)
鏈球菌(不定種)富含脯蛋白11抗體Anti-CHI3L1 Antibody半乳凝3(GAL-3)
枯草芽孢桿菌三磷腺苷受體受體P2X3抗體Anti-CHEK2 Antibody(PB0732)半乳凝3(GAL3)
異常威克漢姆酵母相關血漿蛋白A抗體Anti-CHM Antibody白介8(IL-8)
鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質量規格:0.98
費氏中華根瘤菌Sinorhizobium│fredii 質量規格:>98.5%,BR
嗜麥芽寡養單胞菌Stenotrophomonas│maltophilia 質量規格:>99%,二肽肽-4(DPP-4)抑制劑
STAT3抑制劑(SH-4-54)Aurantimonas sp. (3-羧基)三苯基溴化膦病性肝炎Elisa
黑曲霉 2-芐環磷酸腺苷Elisa
福氏嗜冷桿 (4-羧丁基)三苯基溴化膦甲型肝炎病抗體Elisa
皺褶假絲酵母 甲氧甲酰基三苯基溴化膦活性氧簇Elisa
藤倉鐮孢 丁基三苯基溴化膦(TBP)Toll樣受體9Elisa
牛肝 3-氟-4-甲β-羥基丁酸Elisa
泰國葡糖桿 4-氨基環己甲酸游離脂肪酸Elisa
粘紅酵母 4,4'-二甲苯亞砜磷脂Elisa
靈芝 2-甲氧基酚噻乙型肝炎病E抗原Elisa
綠產色鏈霉 3-巰基-1-烷磺酸鈉乙型肝炎病E抗體Elisa
假單胞 甲脒亞磺酸主要組織相容性復合體Ⅱ類Elisa
根霉 2,2-二甲基-6,6,7,7,8,8,8-七氟-3,5-辛二酮主要組織相容性復合體Ⅰ類Elisa
溜曲霉 (-)2,2′-(3α,8α-二氫-8H-茚并[1,2--d]噁唑Toll樣受體3Elisa
桃色枝頂孢 烯基苯基Toll樣受體7Elisa
大腸埃希 2-溴甲基烯酸乙酯單核趨化蛋白1Elisa