詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
中文名稱:γ-secretase抑制劑(BMS-708163)
英文名稱:BMS-708163
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發貨周期:1~3天
商品介紹:
BMS-708163是有效的γ-secretase抑制劑,抑制Aβ42和Aβ40的產生,IC50值分別為0.27nM和0.30nM;同時抑制Notch胞內結構域(NICD)和CYP2C19,IC50值分別為0.84nM和20μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1146699-66-2 別名:Avagacestat 純度:99.93% 分子量:520.89 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
大豆慢生根瘤菌抗內膜抗原Anti-CHST2 Antibody人可溶性CD38(sCD38)
尖鐮孢內皮抑/內皮他丁抗原Anti-CHST6 Antibody人可溶性CD38(sCD38)
擬青霉E.coli O6大腸桿菌菌體蛋白Anti-CHST9 Antibody人可溶性CD21(CR2/sCD21)
芽孢桿菌屬普通大腸埃希菌菌體蛋白(致病性)Anti-CHSY1 Antibody人可溶性CD21(CR2/sCD21)
模擬乳粉蠟樣芽胞桿菌質控樣品(定量)EphA1-R受體抗原Anti-CHST8 Antibody人可溶性瘦受體(sLR)
側耳紅生成受體抗原Anti-CIAO3 Antibody人可溶性瘦受體(sLR)
黃綠木霉磷化絲裂原活化蛋白激1/2抗原Anti-CHSY1 Antibody人Toll樣受體9(TLR-9/CD289)
絲裂原活化蛋白激抗原Anti-CIB2 Antibody人Toll樣受體9(TLR-9/CD289)
Au(黑木耳)絲裂原活化蛋白激3抗原Anti-CIDEB Antibody人轉化生長因子β2(TGFβ2)
巧克力色微桿菌絲裂原活化蛋白激4抗原Anti-CIB3 Antibody人轉化生長因子β2(TGFβ2)
Ag13(蘑菇)人磷化雌激受體α多肽抗原Anti-CIT Antibody人單核趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)
釀酒酵母磷化雌激受體α抗原Anti-CKS1B Antibody人單核趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)
巴氏葡萄球菌雌激受體α抗原Anti-CKS2 Antibody人白三烯D4(LTD4)
東方伊薩酵母雌激受體α抗原Anti-CKMT2 Antibody人白三烯D4(LTD4)
Methylobacterium雌激受體β抗原Anti-CKS1B Antibody人N鈣黏蛋白/神經鈣黏蛋白(N-Cad)
煙曲霉Ets轉錄因子家族ets1抗原Anti-CKS2 Antibody人N鈣黏蛋白/神經鈣黏蛋白(N-Cad)
酪磷PTPδ抗體蛋白酪磷D受體抗體土壤伯克氏菌人食管腺癌細胞
魚精蛋白2抗體短乳桿菌人脊索瘤細胞
豬繁殖與呼吸綜合征/豬藍耳病抗體耐放射異常球菌奶牛乳腺上皮細胞
凋亡相關蛋白10抗體青春雙歧桿菌人腎小球系膜細胞
γ-secretase抑制劑(BMS-708163)大腸桿 6-阿魏酰梓
奇異球屬 6-Epiharpagoside
空泡單胞 6-Epiharpagide
小孢根霉須狀變種 6-Deoxy-9α-hydroxycedrodorin
解淀粉芽孢桿 6-Deoxy-3-O-methyl-β-allopyranos
蕁麻青霉 6,8-Diprenylorobol
球形賴芽孢桿 5β-Hydroxycostic acid
粗糙脈孢 5α-Hydroxycostic acid
硬水黃桿 5-Hydroxy-1,7-bis(4-hydroxypheny
戊糖乳桿 5'-Demethylaquillochin
堆形艾耳球蟲 5-乙酰氧基羅漢松脂二甲
黑球漆斑 5,5'-Dimethoxylariciresinol 4-O-
芽孢桿屬 5-(3-Hydroxypropyl)-7-methoxyben
平菇 4'-O-Methyllicoflavanone
芽孢桿 4'-Demethyl-3,9-dihydroeucomin