詳細介紹
商品介紹:
PP1是一種有效的選擇性Src家族抑制劑,抑制Lck和Fyn,IC50分別為5和6nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:172889-26-8 別名:AGL 1872;EI 275 純度:99.68% 分子量:281.36 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
PP1 | 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
假單胞菌大鼠二氧化Anti-MAPKAPK3 Antibody人腎(Renin)
平流層芽孢桿菌小鼠抗紅抗體Anti-MARCH2 Antibody人腎(Renin)
糞腸球菌麻疹病 IgG(間接法二步法)Anti-MARCH3 Antibody人腎上腺(EPI)
紅球菌麻疹病 IgM(間接法二步法)Anti-MARCH4 Antibody人腎上腺(EPI)
青霉屬柯薩奇病 IgG 混合型(間接法二步法)Anti-MARCH3 Antibody人雌二受體(ER)
布魯氏菌柯薩奇病 IgM 混合型(間接法二步法)Anti-MARCH5 Antibody人雌二受體(ER)
藤黃微球菌柯薩奇病 IgG Ⅰ(間接法二步法)Anti-MARCKS Antibody人甲狀旁腺激相關蛋白(PTHrP)
貪噬菌柯薩奇病 IgM Ⅰ(間接法二步法)Anti-MARK1 Antibody人甲狀旁腺激相關蛋白(PTHrP)
葉生布勒擔子酵母柯薩奇病 IgG Ⅱ(間接法二步法)Anti-MARK3 Antibody人血管緊張原(aGT)
平菇柯薩奇病 IgG Ⅲ(間接法二步法)Anti-MARCKS Antibody人血管緊張原(aGT)
范巴倫氏分支桿菌柯薩奇病 IgG Ⅳ(間接法二步法)Anti-MAS1 Antibody人血管緊張Ⅰ(Ang-Ⅰ)
蘋果黑腐皮殼柯薩奇病 IgG ⅤAnti-MARK4 Antibody人血管緊張Ⅰ(Ang-Ⅰ)
淺白隱球酵母柯薩奇病 IgG Ⅵ(間接法二步法)Anti-MAST2 Antibody人卵泡抑(FS)
大腸埃希氏桿菌合胞病 IgG(間接法二步法)Anti-MAST4 Antibody人卵泡抑(FS)
蠟狀芽孢桿菌合胞病 IgM(間接法二步法)Anti-MASTL Antibody人甲狀腺抗體(TAb)
魯氏接合酵母艾柯病 IgG(間接法二步法)Anti-MASTL Antibody人甲狀腺抗體(TAb)
Notch轉錄調控蛋白RBPJK抗體細黃鏈霉菌鼠頰黏膜鱗癌細胞
核糖核抑制因子1抗體藤黃色鏈霉菌人纖維肉瘤細胞系
環指蛋白41抗體吸水鏈霉菌人直腸癌腫瘤工程細胞
絲羧肽1抗體灰色鏈霉菌人乳腺癌腫瘤工程細胞
Src家族抑制劑(PP1)皮落青霉 咖啡酸樺木酯
綠產色鏈霉 Bauerenol acetate
靈芝 Barpisoflavone A
表皮葡萄球 馬兜鈴內酰 FI
橄欖色盾殼霉 Aristolactam BII
釀酒酵母 Annonacin
靈芝 Anhydroglycinol
根霉屬 當歸堿
米根霉 Alpinumisoflavone acetate
大腸埃希 貓尾草異黃酮
大豆慢生根瘤 麥珠子酸
維及尼鏈霉 澤瀉
中國蜜環 Acantrifoside E
平田頭菇 9β,13β-Epidioxyabiet-8(14)-en-18
大腸埃希 9-Oxoageraphorone