詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
英文名稱:AS703026
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發貨周期:1~3天
商品介紹:
AS703026是一種高效,具有選擇性,ATP非競爭性的MEK1/2別構抑制劑,主要用于癌癥研究。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1236699-92-5 別名:Pimasertib;MSC1936369B 純度:96.80% 分子量:431.2 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
香菇角蛋白18抗原(C端)Anti-CDH7 Antibodyp53上調凋亡調節因子(PUMA)
彩色豆馬勃角蛋白14抗原Anti-CDH6 Antibodyp21蛋白激活激4(PAK4)
解淀粉芽胞桿菌角蛋白16抗原Anti-CDK10 AntibodyO-巖藻糖肽3-β-N-乙酰基葡萄糖轉移(RFNG)
蠟狀芽孢桿菌角蛋白17抗原Anti-CDK1 AntibodyO-唾液糖蛋白內肽(OSGEP)
黑木耳角蛋白1/8/19抗原Anti-CDH9 AntibodyOtubain2蛋白(OTUB2)
微球菌角蛋白2抗原Anti-CDH8 AntibodyOtubain1蛋白(OTUB1)
枯草芽孢桿菌角蛋白5抗原Anti-CDK11B AntibodyOsterix蛋白(OSX)
忠清南道鹽單胞菌角蛋白7抗原Anti-CDK1 AntibodyOpiorphin蛋白(OPI)
芽孢桿菌角蛋白8(多肽)Anti-CDK2 AntibodyO-6-甲基鳥DNA甲基轉移(MGMT)
綠木霉酪蛋白激2相互作用蛋白1抗原Anti-CDK20 AntibodyN-乙酰轉移9(NAT9)
慕尼黑分枝桿菌鈣激活離子通道4抗原Anti-CDK2AP1 AntibodyN-乙酰轉移8樣蛋白(NAT8L)
枯草芽孢桿菌c-mer原癌基因酪激抗原Anti-CDK2AP2 AntibodyN-乙酰轉移8B(NAT8B)
豬丹絲菌c-Myc tag標簽多肽Anti-CDK2AP1 AntibodyN-乙酰轉移8(NAT8)
魯氏毛霉AU5 tag標簽抗原Anti-CDK5R2 AntibodyN-乙酰轉移6(NAT6)
淺黃色假單胞菌AU1 tag標簽多肽Anti-CDK5R1 AntibodyN-乙酰轉移5(NAT5)
絲球毛霉Glu-Glu Tag多肽蛋白Anti-CDK5RAP2 AntibodyN-乙酰轉移2(NAT2)
原鈣粘蛋白γB6抗體肺炎鏈球菌小鼠腦神經膠質母細胞
原鈣粘蛋白γC3抗體化膿性鏈球菌人外周血單核細胞
原鈣粘蛋白γC4抗體陰溝腸桿菌陰溝亞種小鼠肺泡巨噬細胞
妊娠區帶蛋白PZP抗體嗜熱脂肪地芽孢桿菌人皮膚成纖維細胞
MEK1/2別構抑制劑(AS703026)富士山紅酵母 毛萼晶乙
ATCC 35659 Magnoloside A
鏈輪枝 Magnolianin
嗜麥芽糖寡養單胞 大果桉 L
許旺酵母 大果桉 K
耐鹽深海球 大果桉 J
黑曲霉 垂石松酸 A
松口蘑 大果桉 I
膠紋靈芝 Longifloroside A
佛羅里達側耳 檸檬酸
副雞嗜血桿 Leuconolam
解淀粉芽孢桿 Labd-13-ene-8,15-diol
克魯斯假絲酵母 南五味子酸
泡盛曲霉 2,2,4-基-1,3-戊二
貝倫格葡萄座腔 Itol A