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詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
TAPI-1 | 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg | 1～3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：
TAPI-1是特異的TACE（TNF-α轉換酶）抑制劑。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！ CAS號：163847-77-6 純度：99.89% 分子量：499.6 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環。
鼠李糖乳桿菌PE-Cy7標記的羊抗人IgGAnti-SPRY2 Antibody高遷移率族蛋白17(HMG17)
蠟樣芽孢桿菌Cy3標記的羊抗人IgGAnti-SPHK2 Antibody高遷移率族蛋白1(HMG1)
產氣莢膜梭菌 C型Cy5標記的羊抗人IgGAnti-SPR Antibody高遷移率族ATHook蛋白2(HMGA2)
乳桿菌Cy5.5標記的羊抗人IgGAnti-SPI1 Antibody高遷移率族ATHook蛋白1(HMGA1)
紫丁香蘑PE-Cy3標記的羊抗人IgGAnti-SPN Antibody(PB0114)高分子量激肽原(HMWK)
嗜熱鏈球菌PE-CY5標記的羊抗人IgGAnti-SPRY4 Antibody高爾基體蛋白B1(GOLGB1)
芽胞桿菌APC標記的羊抗人IgGAnti-SPTLC1 Antibody高爾基體蛋白A8家族成員A(GOLGA8A)
谷棒桿菌Alexa Fluor 350標記的羊抗人IgGAnti-SQSTM1 Antibody高爾基體蛋白A7(GOLGA7)
釀酒酵母羅丹明標記的羊抗人IgMAnti-SPTLC1 Antibody高爾基體蛋白A6(GOLGA6)
涎沫假絲酵母Cy5.5標記的羊抗人IgMAnti-SRC Antibody高爾基體蛋白A5(GOLGA5)
英諾克李斯特菌Cy7標記的羊抗人IgMAnti-SRC Antibody(PB0080)高爾基體蛋白A4(GOLGA4)
PE標記的羊抗人IgMAnti-SRC Antibody高爾基體蛋白A3(GOLGA3)
爪哇根霉PE-Cy3標記的羊抗人IgMAnti-SRG2 Antibody高爾基體蛋白A2(GOLGA2)
枯草芽孢桿菌PE-CY5標記的羊抗人IgMAnti-SQSTM1 Antibody高爾基體蛋白A1(GOLGA1)
陳華癸氏中間根瘤菌APC標記的羊抗人IgMAnti-SRD5A1 Antibody高爾基糖蛋白1(GLG1)
季也蒙有孢漢遜酵母Alexa Fluor 350標記的羊抗人IgMAnti-SRG4 Antibody高爾基磷蛋白3(GOLPH3)
核抑制蛋白磷1抗體拜耳接合酵母大鼠腦膜細胞提取物
G21蛋白質抗體血紅紅曲菌大鼠神經小膠質細胞提取物
腈水解1抗體嗜堿芽孢桿菌大鼠牙乳頭細胞提取物
神經腫瘤Nova2抗原抗體土壤短芽孢桿菌大鼠表皮黑色細胞提取物
TNF-α轉換酶TACE抑制劑(TAPI-1)地衣芽孢桿 BOC-L-天氨酸β-芐酯
紫色紅曲霉 竹紅
毛木耳 芴甲氧羰基-N-三苯甲基-L-天冬酰
土曲霉原變種 4',5,8-三羥基-3',6,7-氧基黃酮
蠟狀芽孢桿 延命草
維氏氣單胞 BOC-N-β-Trityl-L-天門冬酰
新生隱球 疏展香茶菜寧B
芹側耳（杏鮑菇） Nα-FMOC-Nω-PBF-D-精氨酸
苔蘚隱球酵母 8-羥基松脂
乳桿屬 小構樹A
蘇云金芽孢桿 5,7-二甲氧基-3,3',4'-三羥基黃酮
泡盛曲霉 (-)-表松脂酚
短桿狀馬賽 環桑
屎腸球 植酸鈣
細黃鏈霉 (-)-二氫槲皮
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