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詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
GW843682X | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | 1～3天 |
商品介紹：
GW843682X是PLK1和PLK3抑制劑，IC50分別為2.2nM和9.1nM，比對其它30種激酶的抑制性高超過100倍。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！ CAS號：660868-91-7 別名：GW843682 純度：99.75% 分子量：477.46 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環。
間型腐霉磷化鈣介質抗原Anti-CAPN11 AntibodySnurportin1蛋白(SNUPN1)
羊泰勒蟲（張家川株-2）神經激肽A受體（多肽抗原）Anti-CAPN12 AntibodySnail同源物1(SNAI1)
大豆慢生根瘤菌鈣蛋白（多肽）Anti-CARD10 AntibodySmoothened蛋白(SMO)
秦氏蜜環菌炎癥負調控因子蛋白（抗原）Anti-CAPN9 AntibodySmoothelin蛋白(SMTN)
豌豆根瘤菌微管相關蛋白（抗原）Anti-CARD8 AntibodySmad同源物7(Smad7)
霍斯格里蒙菌端粒（催化亞單位）（多肽抗原）Anti-CARD19 AntibodySmad同源物4(Smad4)
宇佐曲霉轉移生長因子–α（抗原）Anti-CARF AntibodySmad同源物3(Smad3)
掌狀花耳鈣/鈣調依賴蛋白激2α抗原Anti-CARF AntibodySmad同源物1(Smad1)
微小桿菌鈣/鈣調蛋白依賴蛋白激IG抗原Anti-CARM1 AntibodySlit同源物3(Slit3)
委內瑞鏈霉菌轉移生長因子–β1（抗原）Anti-CASP4 AntibodySlit同源物2(Slit2)
節桿菌屬鈣/鈣調依賴蛋白激2b抗原Anti-CASP5 AntibodySlit同源物1(Slit1)
環狀芽胞桿菌Park7/DJ-1/CAP1抗原Anti-CASP7 AntibodySlingshot同源物3(SSH3)
稻平臍孺孢環化相關蛋白CAP-2抗原Anti-CASZ1 AntibodySlingshot同源物2(SSH2)
生脂固氮螺菌轉移生長因子–β2前體肽Anti-CAVIN3 AntibodySlingshot同源物1(SSH1)
枯草芽孢桿菌轉移生長因子–β3（抗原）Anti-CASP9 AntibodySideroflexin5蛋白(SFXN5)
植物乳桿菌植物亞種轉移生長因子β受體2（多肽抗原）Anti-CBFA2T3 AntibodySideroflexin4蛋白(SFXN4)
PGBD3蛋白抗體Phaeobacterinhibens人成神經細胞瘤（來自骨髓）
蛋白激Cα相互作用蛋白1抗體Fulvimarinapelagi大鼠肝癌細胞
絲/蘇蛋白激5抗體Aurantimonascoralicida人視網膜內皮細胞
蛋白質磷1G抗體PP2CγPsychrobacillusinsolitus小鼠腦微血管內皮細胞
PLK1和PLK3抑制劑（GW843682X）根瘤 5,8,4'-Trihydroxy-7-methoxyflavo
球孢白僵 5,5'-Dimethoxylariciresinol
梭 5,7,3'-Trihydroxy-4'-methoxy-8-p
大麥類芽胞桿 4'-O-trans-p-Coumaroylmussaenosi
球孢白僵 4-O-Methylhelichrysetin
大蓋小皮傘 4-羥基三尖杉堿
水生黃桿 4-Hydroxy-3-(3-methyl-2-butenoyl
黏瓊脂芽孢桿 4',9,9'-Trihydroxy-3'-methoxy- 3
環狀芽胞桿 4,5-Epoxyartemisinic acid
水生恩氏 4,5-Dihydroblumenol A
釀酒酵母 3-O-(E)-p-Coumaroylbetulin
詹氏酸桿 3-Isomangostin hydrate formate
溜曲霉 3-Hydroxy-5,7-dimethoxy-3',4'- m
米根霉 3-Geranyl-4-methoxybenzoic acid
茸毛褐褶 3-去氧蘇木酮 B
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