詳細介紹
商品介紹:
D8-MMAE是MMAE的氘代形式。MMAE抑制微管蛋白的聚合。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:2070009-72-0 別名:D8-Monomethyl auristatin E;D8-Vedotin 純度:98.31% 分子量:726.03 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
D8-MMAE | 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
堀越氏芽孢桿菌26S蛋白調節(jié)亞型p55抗體Anti-Cd59 Antibody6-羥多巴(6-OHDA)
類芽孢桿菌過氧化物肌氧化抗體Anti-CD58 Antibody60S核糖體蛋白L36a-樣(RPL36AL)
白色短單胞菌prox-1抗體Anti-CD55 Antibody(PB0508)60S核糖體蛋白L17(RPL17)
荷葉離褶傘(都不提供)周圍神經(jīng)髓鞘蛋白2抗體Anti-CD59 Antibody5脂加氧(5-LO/LOX)
芽孢桿菌蛋白激R抗體Anti-Cd63 Antibody5羥乙(5-HIAA)
黃曲霉胰脂肪抗體Anti-CD63 Antibody(PB0236)5-羥色受體6(HTR6)
粉質棒束孢前列腺E2受體2抗體Anti-CD68 Antibody5羥色(5-HT)
豇豆慢生根瘤菌蛋白體激活因子PA28γ抗體Anti-CD68 Antibody5羥基乙(5-HIAA)
釀酒酵母受磷蛋白/心臟磷蛋白抗體Anti-CD68 Antibody5羥二十碳四烯(5-HETE)
粘質沙雷氏菌肽聚糖識別蛋白1抗體Anti-CD7 Antibody5核苷(5-NT)
芽孢桿菌屬前脹亡受體誘導膜損傷蛋白抗體Anti-CD7 Antibody5'-AMP活化蛋白激α-2催化亞基(PRKAA2)
白地霉多腺苷二磷多聚3抗體/多聚ADP-核糖聚合3Anti-CD69 Antibody4-羥基壬烯(HNE)
短小芽孢桿菌多腺苷二磷多聚4抗體/多聚ADP-核糖聚合4Anti-CD7 Antibody40S核糖體蛋白S19(RPS19)
膠孢聚腺苷養(yǎng)結合蛋白4抗體Anti-CD72 Antibody3氧代5α類固4脫氫2(SRD5A2)
富士山紅酵母肝再生磷酯2抗體Anti-CD71(TFRC) Antibody3型1-磷鞘受體(S1P3)
枯草芽孢桿菌蛋白Z抗體Anti-CD72 Antibody3-硝基酪(3-NT)
猴頭菇Hericium│erinaceus (Bull.) Pers. 質量規(guī)格:>98%,BR
鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質量規(guī)格:>98%,BR
草木樨中華根瘤菌Ensifer│meliloti (Dangeard) Young 質量規(guī)格:0.98
微管蛋白聚合抑制劑(D8-MMAE)康寧木霉 肉湯培養(yǎng)基II群禽腺病4型抗體Elisa
Paenibacillus agarexedens 瓊脂培養(yǎng)基J坦布蘇病E蛋白Elisa
產氣莢膜梭 C型 瓊脂培養(yǎng)基K乙型肝炎E抗原Elisa
桔青霉 瓊脂培養(yǎng)基L乙型肝炎病表面抗原Elisa
種中心 生活飲用水總大腸群質控樣品(多管發(fā)酵法) 瓊脂培養(yǎng)基M谷轉氨Elisa
樟疫霉 瓊脂培養(yǎng)基N疫里默氏桿抗體Elisa
蘇云金芽孢桿 瓊脂培養(yǎng)基O糖皮質Elisa
雅致放射毛霉 培養(yǎng)基P生長Elisa
裂褶 培養(yǎng)基Q褪黑Elisa
魯考弗美奇酵母 培養(yǎng)基R病性肝炎抗體Elisa
類諾卡氏 鳥氨酸脫羧-O157生化鑒定髓樣分化因子88Elisa
動球 棉子糖發(fā)酵管-O157生化鑒定轉錄因子Elisa
巴斯德畢赤酵母 肉湯培養(yǎng)基A核因子κBElisa
孢小克銀漢霉輪生變種 瓊脂培養(yǎng)基B腸炎病Elisa
蘇云金芽孢桿云南亞種 瓊脂培養(yǎng)基C瘟病Elisa