詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Tyrphostin A9 | 1mL(10mM)|50mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
Tyrphostin A9(AG17)是51種酪氨酸激酶抑制劑,是線粒體分裂誘導劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:10537-47-0 別名:AG 17;Tyrphostin 9;Malonoben 純度:98.0% 分子量:282.38 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
耐冷冷桿菌骨形態發生蛋白4(抗原)Anti-CACNA2D4 AntibodyTBC1域家族成員10C(TBC1D10C)
扣囊復膜孢酵母小鼠胎盤生長因子(多肽抗原)Anti-CACNA2D4 AntibodyTATA框結合蛋白關聯因子2(TAF2)
淡紫擬青霉胎盤生長因子(多肽抗原)Anti-CACNB3 AntibodyTATA框結合蛋白關聯因子13(TAF13)
牛奶類芽胞桿菌人胎盤生長因子(多肽抗原)Anti-CACNG2 AntibodyTATA框結合蛋白關聯因子1(TAF1)
藍色小單孢菌蛋白磷酯-1(抗原)Anti-CACNG4 AntibodyTATA盒結合蛋白(TBP)
灰樹花骨成型蛋白受體1A抗原Anti-CACNG3 AntibodyTaperin蛋白(TPRN)
側耳木霉D型-過氧化活化增生受體(多肽)Anti-CACNG1 AntibodyTAO激3(TAOK3)
梨形毛霉蛋白質磷-2A(抗原)Anti-CACNG7 AntibodyTAO激2(TAOK2)
榆生玉蕈B特異性轉錄因子抗原Anti-CACNG5 AntibodyTAO激1(TAOK1)
毛霉屬蛋白磷酯-2B 催化亞單位(抗原)Anti-CACTIN AntibodyTANK結合激1(TBK1)
羽扇豆根瘤菌孕激受體(抗原)Anti-CAD AntibodyTalpid3蛋白(Talpid3)
蘭灰鏈霉菌早老蛋白-1(抗原)Anti-CACTIN AntibodyTalanin蛋白(TALN)
淡紫擬青霉早老蛋白-1(S182)Anti-CADM2 AntibodyTafazzin蛋白(TAZ)
芽孢桿菌屬癌易感基因1抗原(小鼠 大鼠)Anti-CALB2 AntibodyS抗原(SAG)
枯草芽孢桿菌癌易感基因1抗原Anti-CADM4 AntibodySyntabulin蛋白(SYBU)
淡紫青霉突觸后密度蛋白95(抗原)Anti-CAF1B AntibodySynleurin蛋白(SLRN)
原鈣粘蛋白β4抗體Deinococcusaerolatus雞巨噬細胞
原鈣粘蛋白γ10抗體Oceanicolagranulosus人血管平滑肌細胞
原鈣粘蛋白γA4抗體Oceanicolabatsensis人氣道平滑肌細胞
原鈣粘蛋白γA2抗體Citreicellaaestuarii人主動脈血管平滑肌細胞
51種酪氨酸激酶抑制劑(Tyrphostin A9)阪崎氏年輕泰坦桿(阪崎克羅諾桿) 3,4,5-氧基肉桂酸
嗜酸寡養單胞 沒食子酸乙酯
大腸埃希氏桿 2,4-二羥基苯乙酮
PET-24a 2,4-二羥基二苯甲酮
閃孢巴克斯霉 2-羥基-4’-甲氧基二苯甲酮
枯斑擬盤多毛孢 反-4-甲氧基肉桂酸
鐮刀屬 4-甲氧基肉桂酸
枝鏈霉 4,5-二基咪唑
平臍蠕孢 2--1-甲基代吡啶
水生黃桿 6--1-羥基苯并三氮唑
糾纏青霉 Barbacarpan
便攜式激光測距儀 矮陀陀酰堿 A
支氣管敗血波氏 Anhydrotuberosin
脂節擔 苦杏堿 A
短芽孢桿 Adynerigenin β-neritrioside