非核苷抑制劑(Nesbuvir)公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-NF-M/FITC 熒光素標(biāo)記中分子量神經(jīng)絲蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-VSV-G tag/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記VSV-G tag標(biāo)簽抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
P53凋亡刺激蛋白2 anti-ASPP2 0.1ml
Goat

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

藁本（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Tiopronin組蛋白去基化JARID1B抗體包裝25g

藁本內(nèi)酯英文名稱： Tiopronin硫角質(zhì)抗體包裝5g

告達(dá)亭苷元(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Doxofylline角質(zhì)生長因子調(diào)節(jié)蛋白2抗體包裝25g

戈米辛D(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Doxofylline離子通道蛋白G蛋白4抗體包裝5g

戈米辛G(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱：  PRT062607 (P505-15, BIIB057) HCl通道多聚體結(jié)構(gòu)域KCTD18抗體包裝1g

戈米辛H英文名稱： Columbamine胞質(zhì)接頭蛋白Keap1包裝250mg

戈米辛J(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Proflavine hydrochloride舞蹈癥相關(guān)蛋白KALRN抗體包裝5g

戈米辛N(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Azlocillin sodium內(nèi)流通道蛋白Kir4.1抗體包裝100g

戈米辛O英文名稱： Geldanamycin樣蛋白3抗體包裝25g

格列風(fēng)內(nèi)酯（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Bafilomycin A1, from Streptomyces griseusKLF樣轉(zhuǎn)錄因子7抗體包裝5g

葛根（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Efaproxiral SodiumKelch樣蛋白8抗體包裝25g

葛根(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Amlexanox離子通道蛋白家族KCNQ2抗體包裝5g

葛根-6''-O-木糖苷英文名稱： (+)-Usnic acid 離子通道多聚體結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體包裝1g

葛根芹菜糖苷英文名稱： (+)-Usnic acid 通道蛋白1抗體包裝25g

蛤蚧（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Anisomycin, from Streptomyces griseolus電壓門控通道蛋白1抗體包裝5g

鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品抗血小板抗體試劑盒甘露糖;D-Mannitol

土星擬威爾酵母土星變種Williopsis│saturnus var. saturn 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品抗血小板抗體試劑盒枸櫞;Citric acid mono

產(chǎn)堿假單胞菌Pseudomonas│alcaligenes 質(zhì)量規(guī)格：1M in H2O(260Mg/ml),進(jìn)口原裝抗胸腺球蛋白試劑盒瓜子金皂苷己;Polygalasapon
非核苷抑制劑(Nesbuvir)原鈣粘附蛋白β10抗體帕米膦 PACAP-27 (6-27) (human,chicken, mouse, ovine,porcine, rat)

原鈣粘附蛋白β6抗體帕潘立 PACAP-38 (16-38) (human,chicken, mouse, ovine,porcine, rat)

原鈣粘附蛋白β14抗體泮托拉唑鈉1.5水合物 PACAP-Related Peptide (1-29)(rat)

鈣粘蛋白LKC抗體泮托拉唑鈉一水物 Pancreatic Polypeptide,human

PLEKHA7蛋白抗體替佐米中間體I Pancreatic Polypeptide, rat

鈣粘蛋白21抗體匹多莫德 Parathyroid Hormone (1-38),human

鈣粘蛋白β12抗體匹卡米 Pentagastrin

磷化磷脂酰肌激調(diào)節(jié)亞單位gamma抗體匹可硫鈉；匹克硫鈉 Peptide YY, Human

狀旁腺激相關(guān)蛋白抗體撲熱息痛/對乙酰酚 Peptide YY (canine, mouse,porcine, rat)