詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
NVP-TAE 684 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
NVP-TAE684是一種高效的,選擇性的ALK抑制劑,阻止ALCL衍生的ALK依賴性細胞株的生長,IC50值為2-10nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:761439-42-3 純度:99.64% 分子量:614.2 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
栗疫菌生物標記的羊抗大鼠IgGAnti-SMURF2 Antibody骨骼肌快肌肌鈣蛋白I(TNNI2)
蘇黎世干燥桿菌PE-Cy3標記的羊抗大鼠IgGAnti-SNAI1 Antibody骨骼肌肌動蛋白α1(ACTα1)
鹽桿菌屬PE-CY5標記的羊抗大鼠IgGAnti-SMYD3 Antibody骨鈣(OC)
寄生曲霉APC標記的羊抗大鼠IgGAnti-SMURF2 Antibody骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPRⅡ)
假單胞菌Alexa Fluor 350標記的羊抗大鼠IgGAnti-SNAI2 Antibody(PB0443)骨成型蛋白受體1B(BMPR1B)
出芽短梗霉Alexa Fluor 488標記的羊抗大鼠IgGAnti-SNAI3 Antibody骨成型蛋白受體1A(BMPR1A)
小單胞菌PE-Cy5.5標記的羊抗大鼠IgGAnti-SNAP23 Antibody骨成型蛋白7(BMP7)
副溶血弧菌Cy3標記的羊抗大鼠IgGAnti-SNAP25 Antibody骨成型蛋白4(BMP4)
香菇Cy5標記的羊抗大鼠IgGAnti-SNRPN Antibody骨成型蛋白3(BMP3)
杰丁畢赤酵母Cy5.5標記的羊抗大鼠IgGAnti-SNAP25 Antibody骨成型蛋白2(BMP2)
大腸埃希菌Cy7標記的羊抗大鼠IgGAnti-SOCS1 Antibody骨成型蛋白10(BMP10)
香菇Alexa Fluor 555標記的羊抗大鼠IgGAnti-SOCS1 Antibody谷氧還蛋白5(GLRX5)
幼蟲丹絲菌Alexa Fluor 647標記的羊抗大鼠IgGAnti-SOCS2 Antibody谷氧還蛋白3(GLRX3)
榛針孢酵母辣根過氧化物標記的羊抗豚鼠IgGAnti-SNRPN Antibody(PB0450)谷氧還蛋白2(GLRX2)
秦氏蜜環菌生物標記的羊抗豚鼠IgGAnti-SOCS3 Antibody谷氧還蛋白(GLRX)
釀酒酵母Cy5標記的羊抗豚鼠IgGAnti-SOCS3 Antibody過氧化8(GPX8)
P53誘導細胞凋亡抑制蛋白α抗體耐乳桿菌大鼠表皮角質形成細胞提取物
胞質5'核苷1A抗體白靈側耳(白靈菇)大鼠胎兒真皮成纖維細胞提取物
NOC2家族樣蛋白抗體少孢酵母大鼠視網膜色上皮細胞提取物
尼曼匹克C1前體蛋白抗體白腐菌屬大鼠小梁網細胞提取物
ALK抑制劑(NVP-TAE 684)產氣莢膜梭 C型 1-萘-4-磺酸鈉
大腸埃希氏 草酸酰乙酯
木耳951 4-(三氟甲基)苯甲
表皮葡萄球 25-脫氫升麻 3-O-beta-D-木糖苷
葡萄汁酵母 2,4-二甲基吡咯
沙福芽孢桿 6-羥基酚 3,6,7-三葡萄糖苷
戴爾福特 5-羥色鹽酸鹽
枯草芽孢桿 5,6,7,4'-四羥基黃酮 6,7-二葡萄糖苷
拉曼傘形霉 4-乙基-2-甲氧基
猴頭 白花前胡香豆精II
突尼斯葉桿 對香豆酸
大腸埃希 白花前胡香豆精I
球孢鏈霉 復合穩定劑APD
玫煙色棒束孢 姜狀三七苷R1
大腸埃希氏 復合穩定劑DPD