詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
中文名稱:Aurora A抑制劑
英文名稱:MLN8054
產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發貨周期:1~3天
商品介紹:
MLN8054是Aurora A選擇性抑制劑,IC50為4nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:869363-13-3 純度:98.0% 分子量:476.86 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
灰樹花磷化血小板源性生長因子受體αAnti-CD209 AntibodyAgouti相關蛋白(AGRP)
果蠅克魯維酵母兒茶酚氧化PPO抗體Anti-CD24 AntibodyAFG3樣蛋白2(AFG3L2)
云芝蛋白激C抗體Anti-CD244 AntibodyAdropin(ENHO)
白囊耙齒菌脂滴包被蛋白Perilipin-A抗體Anti-CD244 AntibodyADP-核糖基化因子5(ARF5)
王氏薄孔菌多聚腺苷結合蛋白抗體Anti-CD274 AntibodyADP-核糖基化因子4(ARF4)
焦瑞身氏溶桿菌核纖層蛋白A相關結構蛋白1抗體Anti-CD274 AntibodyADAM金屬肽含血小板反應蛋白1基元4(ADAMTS4)
冷彎曲菌PCID2蛋白抗體Anti-CD2AP AntibodyⅣ型前膠原肽(PⅣNP)
三葉草根瘤菌腺苷硫激1抗體Anti-CD27 Antibody(PB0974)Ⅳ型前膠原基末端肽(PⅣNP)
謝瓦散囊菌腺苷硫激2抗體Anti-CD2AP AntibodyⅣ型膠原(Col Ⅳ)
Winogradskyella multivorans 蛋白激活受體3抗體Anti-CD274 AntibodyⅣ型膠原(Ⅳ-C)
黑曲霉MAWD結合蛋白抗體Anti-CD274 AntibodyⅢ型前膠原肽(PⅢP)
蠟樣芽孢桿菌PCID1蛋白抗體Anti-CD2AP AntibodyⅢ型前膠原肽(PⅢNP)
黑姬菇PDZ結構域PDZK6蛋白抗體Anti-CD30/TNFRSF8 AntibodyⅢ型前膠原基末端肽(PⅢNP)
白橙蓋鵝膏菌吡哆激抗體Anti-CD33 AntibodyⅢ型前膠原基端肽(PⅢNT)
黃溶鏈霉菌PDZ結構域PDZK1蛋白抗體Anti-CD34 AntibodyⅢ型前膠原C端肽(PⅢCP)
Sphingomonas yunnanensis前列腺癌激活蛋白抗體Anti-CD33 Antibody(PB0975)Ⅲ型前膠原(HPCⅢ)
小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質量規格:>98%,BR
: AS1.196資源名稱: 蠟狀芽孢桿菌 質量規格:>98%,BR
白假絲酵母Candida│albicans 質量規格:>98%(T),BR
Aurora A抑制劑黃紅菇 豬丹(疫苗)培養基磷脂Elisa
沙漠奇異球 豬丹培養基(不含吐溫)孕酮Elisa
柱彎孢 改良frey氏培養基睪酮Elisa
金針菇 B5培養基雌二Elisa
熱帶假絲酵母 N6培養基皮質Elisa
鼠李糖乳桿 NLN培養基AKT蛋白Elisa
維羅納假單胞 white培養基DNA甲基轉移3AElisa
米蘭鏈霉 檢定培養基6號(05藥典)DNA甲基轉移3BElisa
空腸彎曲桿 沙門氏屬診VI因子血清I型膠原蛋白Elisa
蒼黃擬無枝酸 霍亂弧O139診斷血清γ干擾Elisa
解脂亞羅酵母 O1群霍亂弧診斷血清白介1Elisa
殼 沙門氏屬診斷血清白介12Elisa
炭疽芽孢桿 美迪衣原體白介2Elisa
條紋炭角 硅烷化試劑白介6Elisa
大腸桿 改良馬丁液體(疫苗)培養基白介8Elisa