詳細介紹
產品屬性:
中文名稱:PSD95抑制劑(Tat-NR2B9c)
英文名稱:Tat-NR2B9c
產品規格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
Tat-NR2B9c是一個PSD95的抑制劑,EC50值是7nM,也能抑制p38. 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:500992-11-0 純度:98.22% 分子量:2518.88 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
釀酒酵母PE-Cy5.5標記的羊抗小鼠IgGAnti-SMAD4 Antibody冠蛋白1B(CORO1B)
產阿拉伯糖漢遜酵母生物標記的羊抗小鼠IgMAnti-SMAD6 Antibody冠蛋白1A(CORO1A)
釀酒酵母辣根過氧化物標記的羊抗小鼠IgMAnti-SMAD5 Antibody寡糖轉移4(OST4)
大腸埃希氏菌羅丹明標記的羊抗小鼠IgMAnti-SMAD5 Antibody寡膈蛋白1(OPHN1)
戴爾根霉FITC標記的羊抗小鼠IgMAnti-SMAD6 Antibody胍基丁脲水解(AGMAT)
豇豆慢生根瘤菌Alexa Fluor 350標記的羊抗小鼠IgMAnti-SMARCA2 Antibody鈷傳遞蛋白Ⅱ(TCN2)
復輪生小克銀漢霉Cy3標記的羊抗小鼠IgMAnti-SMAD9 Antibody骨形成蛋白6(BMP6)
馬鏈球菌馬亞種Cy5標記的羊抗小鼠IgMAnti-SMC3 Antibody(PB0789)骨形成蛋白1(BMP1)
大腸埃希氏菌Cy5.5標記的羊抗小鼠IgMAnti-SMARCAD1 Antibody骨調蛋白(OMD)
變幻青霉Cy7標記的羊抗小鼠IgMAnti-SMARCA4 Antibody骨髓基質抗原2(BST2)
腸桿菌屬Alexa Fluor 647標記的羊抗小鼠IgMAnti-SMC4 Antibody骨髓基質抗原1(BST1)
枯草芽孢桿菌膠體金標記的羊抗小鼠IgMAnti-SMN1/2 Antibody骨肉瘤放大基因9(OS9)
鉤狀木霉堿性磷(AP)標記的羊抗大鼠IgGAnti-SMOX Antibody骨膜蛋白(POSTN)
假單胞菌膠體金標記的羊抗大鼠IgGAnti-SMC6 Antibody骨骼肌特異性受體酪激(MUSK)
*櫻桃鏈格孢FITC標記的羊抗大鼠IgGAnti-SMTN Antibody骨骼肌慢肌肌鈣蛋白T(TNNT1)
紅硬囊果青霉辣根過氧化物標記的羊抗大鼠IgGAnti-SMURF1 Antibody骨骼肌慢肌肌鈣蛋白I(TNNI1)
谷受體3A抗體類高加索奶乳桿菌大鼠腎成纖維細胞提取物
谷受體3B抗體谷棒桿菌Ⅰ型大鼠腎足突細胞提取物
谷受體3A+3B抗體費比恩畢赤酵母大鼠胎兒表皮角質形成層細胞提取物
神經元引導蛋白3抗體乙酰短桿菌大鼠皮下脂肪細胞提取物
PSD95抑制劑(Tat-NR2B9c)少根根霉 3,5-二甲基-2-吡咯甲
玫瑰色野野村氏 苦參
植物乳桿 苦參堿
棲土曲霉 2,4,6-酰二苯氧磷
雜色曲霉 苦參K
新月彎孢紅曲霉 聯甲苯
大麗輪枝孢 苯丁酸
牡丹葡萄孢(都不提供) 硫代硫酸銨
楊奇青霉 豆甾
芽胞桿 氨甲環酸
假單胞屬 β-谷甾烷
黃曲霉 2-乙烷磺酸鈉
Paenibacillus odorifer 蒿草酚A
類阿達青霉 4-羥基
青霉屬 甲基 4-咖啡酰奎尼酸酯
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)