詳細介紹
商品介紹:
Enzastaurin是一種有效的PKCβ抑制劑,IC50值為6nM;對其選擇性是對PKCα,PKCγ和PKCε的6-20倍。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:170364-57-5 別名:LY317615 純度:99.84% 分子量:515.61 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Enzastaurin | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
多主葡萄殼菌MSH同源蛋白1樣蛋白抗體Human NT5DC1 ELISA Kit熱休克蛋白90(HSP-90)
莖點霉屬膜相關環指蛋白6抗體Human NRIP2 ELISA Kit熱休克蛋白72(HSP-72)
大隱球酵母基質金屬蛋白18/19Human NT5M ELISA Kit熱休克蛋白72(HSP72)
淡紫擬青霉富含半胱蛋白質MIG7抗體Human NRSN2 ELISA Kit熱休克蛋白70(HSP-70)
頂孢頭孢霉原癌基因絲/蘇蛋白激MOS抗體Human CRH(Corticotropin Releasing Hormone) ELISA Kit熱休克蛋白70(HSP70)
葡萄座腔菌單核趨化誘導蛋白1抗體Human NPB ELISA Kit熱休克蛋白60(Hsp-60)
鑲邊鏈霉菌肌球蛋白重鏈抗體Human TATC(Thrombin-antithrombin complex) ELISA Kit熱休克蛋白60(HSP60)
砂單胞菌基質金屬蛋白28抗體Human NR1D2 ELISA Kit熱休克蛋白40(HSP-40)
蘇云金芽孢桿菌基質金屬蛋白23抗體Human NR2B ELISA Kit熱休克蛋白27(HSP-27)
鴨疫里氏桿菌MYC誘導線粒體蛋白抗體Human NR2C1(Nuclear receptor subfamily 2 group C member 1) ELISA Kit熱休克蛋白27(HSP27)
枯草芽孢桿菌粘蛋白7抗體Human NR2C2(Nuclear receptor subfamily 2 group C member 2) ELISA Kit熱休克蛋白22(HSP-22)
產短桿菌粘蛋白13抗體Human NRF1 ELISA Kit熱休克蛋白20(HSP-20)
粘蛋白15抗體Human NPB ELISA Kit熱休克蛋白20(HSP20)
華特拉根瘤菌基質金屬蛋白22抗體Human NRIP2 ELISA Kit熱穩定抗原(HSA/CD24)
芽胞桿菌肺癌轉移相關蛋白抗體Human CRH(Corticotropin Releasing Hormone) ELISA Kit缺氧誘導因子1α(HIF-1α)
蠟樣芽孢桿菌候選腫瘤抑制基因MARVELD1抗體Human NR1D2 ELISA Kit缺血修飾白蛋白(IMA)
云南葡萄穗霉Stachybotrys│yunnanensis 質量規格:pH指示劑二氫辣椒堿
鏈霉菌屬Streptomyces│sp. 質量規格:>98.0%(HPLC)辣椒堿
: ATCCBAA-1117資源名稱: 哈維氏弧菌 質量規格:>95.0%(W)β-谷甾
PKCβ抑制劑(Enzastaurin)枯草芽孢桿 β-四氫萘酮腫瘤標志物Elisa
白黃小脆柄菇 2-硝基-1,4-苯二腫瘤壞死因子αElisa
假木豆根瘤 1-四氫萘酮腫瘤壞死因子βElisa
土星漢遜酵母 鄰苯甲轉化生長因子β1Elisa
蠟樣芽胞桿 (蠟狀芽胞桿) 偏苯酸組Elisa
天藍色鏈霉 雙(2,2,6,6-四甲基-4-基)癸二酸酯組織蛋白SElisa
粘紅酵母 噻吩-2-羧酸組織型纖溶原激活劑Elisa
淺黃小孢絲鏈霉 四乙二單十二烷基組織因子Elisa
彎孢 3-(基硅基)炔組織因子途徑抑制物Elisa
釀酒酵母 4-氨基-3-鹽酸鹽巢蛋白Elisa
藤黃節桿 DL-青霉細小病抗體Elisa
巨大芽孢桿 色嗜堿性粒Elisa
肉褐鱗環柄菇 6-甲氧基喹啉肝配蛋白B2Elisa
釀酒酵母 2,7-二氨基芴弓形蟲IgG抗體Elisa
假單胞 5--2,4-二甲氧基嘧啶弓形蟲IgM抗體Elisa