詳細介紹
商品介紹:
GSK-J1是H3K27me3/me2-demethylases JMJD3/KDM6B和UTX/KDM6A的抑制劑,對KDM6B的IC50值為60nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1373422-53-7 純度:99.90% 分子量:389.45 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
產品屬性:
英文名稱:GSK-J1
產品規格:1mL(10mM)|10mg|50mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
地毯草黃單胞菌花葉萬年青致病變種*蛋白體PSMβ6抗體Anti-CD137L(TNFSF9) AntibodyCa2+激活K+通道蛋白2(KCNN2)
土曲霉蛋白體PSMβ7抗體Anti-CD14 AntibodyC4結合蛋白(C4BP)
枯草芽孢桿菌(枯草芽胞桿菌)蛋白酪磷CD148抗體Anti-CD14 AntibodyC1q/TNF相關蛋白3(Cartonectin/CTRP3/CORS-26)
纖維二糖乳桿菌磷化蛋白激C theta抗體Anti-CD14 AntibodyB因子(BF)
克魯維畢赤酵母磷化蛋白激C theta抗體Anti-CD14 AntibodyB受體相關蛋白31(BCAP31)
藍鏈霉菌蛋白激C theta抗體Anti-CD14 Antibody(PB0893)B受體(BCR)
扣囊復膜孢酵母磷化磷脂酰肌激PIK3-γ抗體Anti-CD16/Fcgr3 AntibodyB生長因子(BCGF)
小笠原島坂野酵母磷脂酰肌激PIK3-γ抗體Anti-CD163 AntibodyB淋巴瘤因子6(Bcl6)
齒梗孢霉屬胎盤蛋白14抗體Anti-CD163 AntibodyB淋巴瘤因子3(Bcl3)
彩色豆馬勃磷激α1抗體Anti-CD151 AntibodyB淋巴瘤因子2(Bcl-2)
大腸埃希氏菌(大腸桿菌)*磷化激γ1Anti-CD160 AntibodyB淋巴瘤-XL(Bcl-xl)
藤倉鐮孢親環相關蛋白1抗體Anti-CD163 AntibodyB連接蛋白(BLNK)
Rufibacter磷化激γ2Anti-CD163 AntibodyB活化因子受體(BAFF-R)
Bacillus atrophaeus Nakamura 肝糖原磷化抗體Anti-CD163 AntibodyB活化因子(BAFF)
新城疫病肌肉糖原磷化抗體Anti-CD19 AntibodyB分化因子(BCDF)
枯草芽孢桿菌磷羧化2抗體Anti-CD1B AntibodyBκ輕肽基因增強子核因子抑制因子ε(NFKBIE)
日本裂殖酵母Schizosaccharomyces│japonicus 質量規格:>99%,BR
: AS4.456資源名稱: 淺灰鏈霉菌 質量規格:>98.5%,BR
枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質量規格:>98%,BR
KDM6A/KDM6B抑制劑(GSK-J1)黃曲霉 蔗糖(腦膜炎奈瑟氏)蛋白質羰基化Elisa
褪色沙雷氏(粘質沙雷氏) 果糖(腦膜炎奈瑟氏)海藻糖Elisa
Bacillus anthracis 檸檬酸鐵銨前列腺E合2Elisa
枯草芽胞桿(黑色變種) 吖啶黃前列腺E合2Elisa
金龜子綠僵 酸性L-G培養基基礎S轉移Elisa
白黃鏈霉 堿性L-G培養基基礎4-羥基壬烯Elisa
生暗灰鏈霉 嗜冷計數瓊脂5-羥基壬烯Elisa
大豆慢生根瘤 3%硫化氫甲狀腺Elisa
Lonsdalea quercina subsp. quercina 3%硝酸鹽肉湯促甲狀腺Elisa
芥黃蜜環 缺陷假單胞培養液(SLB肉湯)可溶性蛋白質Elisa
氈毛栓孔 馬鈴薯葡萄糖瓊脂(含霉)熱休克蛋白16Elisa
溫特曲霉 腸球顯色培養基酰基合成Elisa
腐皮鐮孢 0.1%蛋白胨水乙酰CoA羧化Elisa
芍藥枝孢霉 乙酰肉湯脂肪酸合成Elisa
木耳 NB培養基甘油-3-磷酸酰基轉移Elisa