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詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
TAK-901 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1～3天 |
商品介紹：
TAK-901是新型的Aurora A和B抑制劑，IC50分別為21nM和15nM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！ CAS號：934541-31-8 純度：99.80% 分子量：504.64 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環。
根瘤菌人縮Bacillus coagulans小鼠白介2受體(IL-2R)
松鼠葡萄球菌人L-乳脫氫Bacillus coagulans小鼠腎上腺髓質(ADM)
米曲霉人性神經鞘磷脂Bacillus coagulans小鼠腎上腺髓質(ADM)
綠色木霉人花生四烯5脂加氧Bacillus coagulans小鼠可溶性瘦受體(sLR)
草假單胞菌人5脂加氧Bacillus cohnii小鼠可溶性瘦受體(sLR)
黑曲霉人腺苷環化1Paenibacillus ehimensis小鼠β內啡肽受體(β-EPR)
貓埃菲比體人可溶性腺苷環化Bacillus diffusus小鼠β內啡肽受體(β-EPR)
德爾布有孢酵母人鳥脫羧Bacillus firmus小鼠肝脂(HL)
中華游動球菌人蛋白酪激Bacillus firmus小鼠肝脂(HL)
羊邊蟲（綿羊無漿體—承德株）人蛋白酪磷Bacillus firmus小鼠乙型肝炎核心抗體(HBcAb)
產短桿菌人腫瘤壞死因子α轉化Bacillus firmus小鼠乙型肝炎核心抗體(HBcAb)
枯草芽孢桿菌人多形核白彈性蛋白Bacillus firmus小鼠乙型肝炎e抗體(HBeAb)
木蹄層孔菌人尿激型纖溶原激活物Bacillus firmus小鼠乙型肝炎e抗體(HBeAb)
平菇人激肽釋放8Bacillus fusiformis小鼠乙型肝炎e抗原(HBeAg)
豬鏈球菌人激肽釋放6Bacillus flexus小鼠乙型肝炎e抗原(HBeAg)
平菇人果糖1,6二磷縮Bacillus fusiformis小鼠乙型肝炎表面抗體(HBsAb)
原癌基因Yes相關蛋白1抗體*亮葉耳環根瘤菌人外周血淋巴細胞系
相關蛋白2抗體轉錄因子YY1結合蛋白1抗體大花褶傘人張氏肝細胞
鋅指蛋白BED5抗體暗灰鏈霉菌腺病毒轉化的人胚腎細胞
宮頸癌抑制蛋白4抗體狹檐薄孔菌血管平滑肌細胞
Aurora A和B抑制劑(TAK-901)冬莖點霉 1,7-二羥基-3,4-二甲氧基山酮-7-O-葡萄糖苷
卷枝毛霉 β，β’-二甲基烯酰阿寧
副豬嗜血桿 二羥E
纖維纖維微 二氫麻醉椒苫
蠟樣芽孢桿 二氫醉椒
桿狀毛霉 丹葉大黃
相思根瘤 冬綠苷
葡萄座腔 地黃苷D
酵母 地黃苷A
粗狀假絲酵母 γ-倒捻子
鴨疫里氏桿 扁豆堿
皺褶青霉 冬凌草乙
黃曲霉 大黃葡萄糖苷
新城疫病 多舌飛蓬苷
玉蕈屬 丁香樹脂雙葡萄糖苷
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