詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
UKI-1 | 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
UKI-1是尿激酶型纖溶酶原激活劑(u-PA)抑制劑,也能夠抑制癌細胞的侵襲能力。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:220355-63-5 別名:UKI-1C 純度:98.36% 分子量:613.81 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
發酵冬蟲夏草菌粉(標準品)英文名稱: Sotalol HCl磷化活化蛋白激B抗體包裝1g
法篳枝苷英文名稱: H-89 2HCl磷化活化蛋白激B抗體包裝5g
法卡林二英文名稱: Fusidine磷化組蛋白去基化JMJD2B抗體包裝1g
番茄苷英文名稱: Fusidine絲裂原活化蛋白激相互作用蛋白2抗體包裝25g
番茄紅(標準品)英文名稱: 3-Iodo-L-tyrosine絲裂原活化蛋白激相互作用蛋白3抗體包裝5g
番茄堿(標準品)英文名稱: Dess-Martin periodinane磷化基末端激1/2/3抗體包裝1g
番石榴苷(標準品)英文名稱: Cidofovir磷化蛋白質酪激JAK-1抗體包裝25g
番石榴葉(標準品)英文名稱: 5-Amino-4-imidazolecarboxamide基末端激2抗體包裝5g
番瀉苷A(標準品)英文名稱: AGM-1470 連接介導調節蛋白抗體包裝5MG
番瀉苷B(標準品)英文名稱: Sodium taurolithocholate基末端激3抗體包裝50MG
番瀉苷C(標準品)英文名稱: glycochenodeoxycholic acid (GCDCA)磷化活化蛋白激B抗體包裝100g
番瀉苷D(標準品)英文名稱: Sodium taurohyodeoxycholate hydrateJmjC結構域組蛋白去基化H3-K36抗體包裝500g
番瀉葉(標準品)英文名稱: Captisol( beta-Cyclodextrin, sulfobutyl ethers, sodium salts)組蛋白去基化JARID2抗體包裝5g
翻白草(標準品)英文名稱: ValinomycinJAK和微管相互作用蛋白2抗體(JAK和微管相互作用蛋白2)包裝100g
反式茴香腦英文名稱: 5-Chloro-1,3-dimethyl-1H-pyrazole活化蛋白激B抗體包裝25g
隔指孢Dactylella│sp. 質量規格:>99%,BR抗著絲點抗體試劑盒甘草二;Dipotassium gl
鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質量規格:含量≥99.0%(HPLC)抗轉谷酰抗體試劑盒戈米辛J;Gomisin J
孟氏假單胞菌Pseudomonas│mandelii 質量規格:HPLC≥99.0%,標準品抗轉谷酰抗體試劑盒瓜;L(+)-Citrulline
u-PA抑制劑(UKI-1)原癌因蛋白/活化蛋白1抗體卡維丁(標準品) Moxonidine
死亡活化蛋白抗體克拉霉(標準品) Moxonidine
角蛋白19抗體克拉維 Nepafenac
角蛋白2抗體克林霉磷酯(標準品) Nepafenac
角蛋白4抗體克霉唑(標準品) Nicarbazin
色b245輕鏈抗體喹乙;喹酰(標準品) Nimustine HCl(ACNU)
5號染色體開放閱讀框44抗體醌式利福平(標準品) NVP-BEZ 235
心臟特異性絲蛋白抗體拉呋替丁(標準品) Pemirolast potassium
胞漿型磷脂A2抗體拉米夫定(標準品) Perindopril erbumine