詳細介紹
商品介紹:
IPA-3是一種選擇性的,ATP非競爭的PAK1抑制劑,IC50值為2.5μM,對PAKs4-6沒有抑制作用。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:42521-82-4 純度:98.0% 分子量:350.45 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
產品屬性:
中文名稱:PAK1抑制劑(IPA-3)
英文名稱:IPA-3
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
粉肉擬層孔菌絲裂原活化蛋白激激Anti-BEGAIN AntibodyYY1轉錄因子(YY1)
大洋枝芽孢桿菌激-M2(抗原)Anti-BEST1 AntibodyYbeY金屬肽(YBEY)
枯草芽孢桿菌激-M2(抗原)Anti-BIRC2 AntibodyX-轉運蛋白3(Xtrp3)
尖孢鐮孢磷化Rho鳥苷交換因子2抗原Anti-BHLHE41 AntibodyX-轉運蛋白2(Xtrp2)
茶輪斑盤多毛孢菌黑色-A(抗原)Anti-BIRC5 AntibodyX-射線修復交叉互補蛋白6(XRCC6)
微球菌激活受體2A/激活受體相互作用蛋白2a抗原Anti-BIVM AntibodyX-射線修復交叉互補蛋白5(XRCC5)
柞蠶鏈球菌β-抑制蛋白1/2抗原Anti-BLCAP AntibodyX-脯酰肽3(XPNPEP3)
釀酒酵母激活受體2B/激活受體相互作用蛋白2b抗體Anti-BLK AntibodyX-連鎖凋亡蛋白抑制因子(XIAP)
泡囊短波單胞菌褪黑受體(抗原)Anti-BMP10 AntibodyX-框結合蛋白1(XBP1)
Enterobacter cloacae subsp. dissolvens致癌基因(抗原)Anti-BMP3 AntibodyWolfram綜合征蛋白1(WFS1)
核受體輔助抑制因子(抗原)Anti-BMP10 AntibodyWNT抑制因子1(WIF1)
哈茨木霉巢蛋白(神經上皮干蛋白)(抗原)Anti-BMP6 AntibodyWNT1誘導信號通道蛋白2(WISP2)
灰黃青霉α1腎上腺能受體抗原Anti-BMP8A AntibodyWNT1誘導信號通道蛋白1(WISP1)
短桿狀馬賽菌脂肪炎癥因子Apelin36Anti-BMP8B AntibodyWhirlin蛋白(WHRN)
栗酒裂殖酵母巢蛋白(神經上皮干蛋白)(抗原)Anti-BMX AntibodyWAP四二硫化物核心域蛋白5(WFDC5)
核盤菌神經母特異性轉移因子抗原Anti-BNIP2 AntibodyV-Yes-1Yamaguchi肉瘤病相關癌基因同源物(LYN)
胞粘蛋白結合調節蛋白抗體Marivitahallyeonensis人組織細胞淋巴瘤細胞
過氧化物膜蛋白1抗體Roseovariusmarinus人B淋巴細胞
原鈣粘蛋白7抗體Roseivivaxlentus人口腔上皮細胞
原鈣粘附蛋白11X抗體Paucimonaslemoignei小鼠視網膜神經節細胞
PAK1抑制劑(IPA-3)好食脈孢霉 那
枯草芽孢桿 肉桂酰
白色短波單胞 Silwet L-77
雞痘病 司帕沙星
香菇 乙酰螺旋霉
粟酒裂殖酵母 磺對甲氧嘧啶
扣囊復膜孢酵母 托普
假單胞屬 頭孢噻吩鈉
鷹嘴豆枯萎鐮刀 大豆分離蛋白
冷海水黃桿 2,6-二溴苯醌亞
食物鹽單胞 雄酮
車載電源轉換器 鹽酸普奈洛爾
德沃斯氏屬 蛋黃粉
枯斑盤多毛孢 葡萄糖基-β-環糊精
水稻漢納酵母 花生酸甲酯