去泛素化酶抑制劑（DUBs-IN-1）公司*的產品：TNF- Alpha /HRP 辣根過氧化物標記腫瘤壞死因子抗體IgG
TNF- Alpha /HRP 辣根過氧化物標記鼠抗人腫瘤壞死因子-α單克隆抗體IgG
CD34/Biotin 生物標記CD34抗體IgG
TOPO II Alpha/DNA TP II Alpha /FITC 熒光標記DNA拓普西異構Ⅱ抗體IgG
TNF- A

商品介紹：

產品屬性：

中文名稱：去泛素化酶抑制劑（DUBs-IN-1）

英文名稱：DUBs-IN-1

產品規格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

發貨周期：1～3天
公司產品僅用于科研

細胞生物學研究有以下幾個方面：

細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：

①細胞核、染色體以及基因表達的研究；

②生物膜與細胞器的研究；

③細胞骨架體系的研究；

④細胞增殖及其調控；

⑤細胞分化及其調控；

⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細胞的起源與進化；

⑧細胞工程.

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

硫色鐮刀菌Bifidobacterium indicum大鼠白三烯B4(LTB4)

蛋白原乳桿菌Bifidobacterium choerinum大鼠白血病抑制因子受體(LIFR)

哈茨木霉Bifidobacterium pseudocatenulatum大鼠白血病抑制因子受體(LIFR)

棲藻海卵菌Bifidobacterium saeculare大鼠表皮生長因子(EGF)

楊盤二孢菌*Bifidobacterium coryneforme大鼠表皮生長因子(EGF)

蟹味菇（白）Lactococcus lactis subsp. lactis大鼠腸脂肪結合蛋白(iFABP)

枯草芽孢桿菌Bifidobacterium thermacidophilum subsp. porcinum大鼠腸脂肪結合蛋白(iFABP)

大腸桿菌Bifidobacterium gallinarum大鼠端粒(TE)

茶樹菇Enterococcus durans大鼠端粒(TE)

菌生假絲酵母Lactobacillus sp.大鼠基質金屬蛋白5(MMP-5)

日本根霉Clostridium thermocellum大鼠基質金屬蛋白5(MMP-5)

雪白紅鏈霉菌Clostridium thermocellum大鼠基質金屬蛋白4(MMP-4)

尖孢鐮孢Clostridium thermocellum大鼠基質金屬蛋白4(MMP-4)

氣球菌屬Clostridium sp.大鼠基質金屬蛋白9/明膠B(MMP-9/Gelatinase B)

釀酒酵母Clostridium sp.大鼠基質金屬蛋白9/明膠B(MMP-9/Gelatinase B)

豬丹絲菌Clostridium sp.大鼠基質金屬蛋白抑制因子1(TIMP-1)

Rho家族GTP3抗體羊肚菌Ulocladium botrytis

周期D相關蛋白抗體寬鱗大孔菌變鉛青鏈霉菌

維甲相關孤兒受體γ抗體雞腿菇（毛頭鬼傘）大腸埃希氏菌DH5a/pEGFP-CEM15

GTP結合蛋白RAC1+RAC2抗體高羊肚菌大腸埃希氏菌DH5α/T/gfp
去泛素化酶抑制劑（DUBs-IN-1）焦曲霉 β-葡聚糖

蜂房哈夫尼 遼東楤木皂苷V

乳酸乳球乳亞種 芹菜-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷

Bacillus L-半乳糖酸-1,4-內酯

更新世肉桿 川續斷皂苷VI

深綠木霉 異甘草

紫丁香蘑 長春質堿

黑曲霉 文多靈

鏈霉屬 (R型)原人參二

辣乳菇 高香草酸

釀酒酵母 異內酯

健康皮張抗原（山羊皮） 黃芪多糖

麥角 延齡草苷

紅紫青霉 當歸多糖

金針菇 白樺脂