詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Mps1-IN-1 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
商品介紹:
Mps1-IN-1是Mps1高效選擇性抑制劑,IC50值為367nM,對其他352種激酶抑制力基本無,特別是Alk和Ltk。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1125593-20-5 純度:99.61% 分子量:535.66 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
赤褐鵝膏菌胰島受體-α(抗原)Anti-BARD1 Antibodyα2-微球蛋白樣蛋白1(α2ML1)
食用油 B 1 胰島受體-β(抗原)Anti-BAZ2A Antibodyα2-巨球蛋白(α2M)
樟疫霉胰島受體底物-1(抗原)Anti-BCAS3 Antibodyα2-HS糖蛋白(αHSG)
桔梅奇酵母水通道蛋白-3抗原Anti-BCAP31 Antibodyα1-微球蛋白(α1M)
蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種胰島受體底物-2(抗原)Anti-BCL2L11 Antibodyα1-性糖蛋白(α1AGP)
產氣莢膜梭菌 C型水通道蛋白-1抗原Anti-BCAS4 Antibodyα1-抗胰糜蛋白(α1ACT)
熒光假單胞菌胰島受體底物-3(抗原)Anti-BATF3 Antibodyα1-抗(α1AT)
嗜松青霉胰島受體底物-4(抗原)Anti-BCKDK Antibodyα1-B-糖蛋白(α1BG)
短小芽孢桿菌Anti-BCL2L12 AntibodyZinedin蛋白(ZIN)
鍺栓孔菌前列腺E2抗原Anti-BCL6 AntibodyZeste同源物增強子2(EZH2)
粗糙脈孢菌整合-β3(抗原)Anti-BCLAF1 AntibodyZeste同源物增強子1(EZH1)
毛球馬勃屬水通道蛋白-9抗原 (多肽抗原)Anti-BCR AntibodyZeste12同源物1抑制因子2(SUZ12)
蠟狀芽孢桿菌瘦(多肽抗原)Anti-BDKRB1 AntibodyY-染色體胸腺β4(Tβ4Y)
宇佐曲霉B1變種瘦受體(長)(抗原)Anti-BEND4 AntibodyYY肽3(PYY3)
梭形凸臍蠕孢雄激受體(多肽)Anti-BFAR AntibodyYY肽2(PYY2)
炭黑曲霉絲裂原活化蛋白激(抗原)Anti-BEST2 AntibodyYY肽(PYY)
Ⅱ型膠原α1N端前體肽抗體Cystobactergracilis人肺癌細胞(大細胞肺癌)
蛋白香葉烯基轉移1α抗體Roseovariuslitoreus小鼠微血管內皮細胞
蛋白香葉烯基轉移1βFTβ抗體Roseovariushalocynthiae小鼠胚胎瘤細胞
橋粒斑菲蛋白2抗體Roseivivaxsediminis雞淋巴瘤細胞
Mps1抑制劑(Mps1-IN-1)紫色紅曲 乳酸鏈球
Micromonospora 3-叔丁基
中華泰勒蟲(定西株) 纈沙坦
干酪乳桿 酸二鈉
嗜冷假單胞 大孔吸附樹脂AB-8
發酵性酵母 泊
蘋果黑腐皮殼 環基溴
Pseudomonas seleniipraecipitans 燦爛黃
黃傘 百里醌
大腸埃希 百里醌
枯草芽孢桿 硫酸奎尼丁
長柄大環柄菇 4-甲基七葉亭
柯里殼囊孢 硫酸鑭(III) 水合物
灰葡萄孢 4-甲基七葉亭
韓國假單胞 硫酸鑭(III) 水合物