詳細介紹
產品屬性:
英文名稱:BML-277
產品規格:1mL(10mM)|10mg|50mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
BML-277是一種選擇性的檢測點激酶2(Chk2)抑制劑,IC50為15nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:516480-79-8 別名:Chk2 Inhibitor II;C 3742 純度:97.14% 分子量:363.8 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
嗜中溫寒冷桿菌艾滋病病(抗原)Anti-B4GALT3 Antibodyβ-羥丁(OHβ)
解脂亞羅酵母熱休克蛋白-60(抗原)Anti-B4GALT1 Antibodyβ-內啡肽(βEP)
Mucor ardhlaengiktus熱休克蛋白-70(多肽抗原)Anti-B4GALT3 Antibodyβ-骨膠原交聯(βCTx)
寬被多年臥孔菌銜接蛋白α抗原Anti-B4GALT5 Antibodyβ-促脂(βLPH)
白鬼筆Caspase 激活的脫氧核糖核抑制劑(抗原)Anti-BACH2 Antibodyβ2-微球蛋白(β2M)
釀酒酵母胰島降解(抗原)Anti-BAG1 Antibodyβ-1,4-半乳糖轉移1(β4GALT1)
葡萄牙棒孢酵母人胰島樣生長因子-I受體Anti-BAG4 Antibodyβ-1,4-N-乙酰半乳糖基轉移2(β4GALNT2)
需鈉弧菌胰島樣生長因子結合蛋白-5(抗原)Anti-BAGE2 Antibodyβ-1,3-葡糖基移1(β3GAT1)
斑玉蕈胰島(抗原)Anti-BAIAP2L1 Antibodyα-血紅蛋白穩定蛋白(αHSP)
根瘤菌APC活化蛋白C抗原Anti-BAGE3 Antibodyα-乳清蛋白(αLA)
假單胞菌屬脂肪炎癥因子Apelin抗原Anti-BAGE4 Antibodyα-內啡肽(αEP)
巨大芽胞桿菌Apelin receptor抗原Anti-BAIAP2L1 Antibodyα-黑色激(αMSH)
嗜松青霉APG4B自噬相關抗原Anti-BAIAP2L1 Antibodyα-骨膠原交聯(αCTx)
釀酒酵母載脂蛋白A1抗原Anti-BAIAP2L2 Antibodyα-胞襯蛋白(SPTAN1)
黑曲霉凝聚α/β抗原Anti-BAIAP2L2 Antibodyα白蛋白(AFM)
運動發酵單孢菌胰島受體-α(抗原)Anti-BAK1 Antibodyα2-纖溶抑制因子(α2PI)
磷相互作用結構域蛋白1抗體Lysobacterdaejeonensis人正常結腸細胞
磷脂磷2結構域3抗體蘑菇假單胞菌急性髓系細胞白血病細胞
石骨癥相關蛋白PLEKHM1抗體過渡原囊菌人骨髓基質細胞
血小板白細胞C激底物同源結構域M2抗體丁梭菌小鼠單核細胞巨噬細胞
激酶2(Chk2)抑制劑(BML-277)小枝鏈霉 6-羥基-2,5,7,8-四并二氫吡喃-2-羧酸
嗜絲副球 明膠
黏液桿 N-甲基-D-天冬
產酸酸桿 乙氧基喹啉
枯草芽胞桿 生物酰肼
枯草芽孢桿 羧甲基殼聚糖
鼠李糖乳桿 睪酮
類植物乳桿 新亞甲藍N
彩色豆馬勃 司他夫定
成團泛 5-氨基乙酰酸鹽酸鹽
土地桿屬 三磷酸腺苷酸
滑假絲酵母 二十四烷
哈茨木霉 頭孢噻呋鈉
釀酒酵母 5-氨基熒光
谷棒桿Ⅰ型 檸檬酸鉍
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)