詳細介紹
商品介紹:
TAPI-2是基質金屬蛋白酶(MMP),腫瘤壞死因子α轉換酶(TACE)和解聯蛋白和金屬蛋白酶(ADAM)的廣譜抑制劑,對MMP的IC50值為20±10μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:187034-31-7 純度:95.93% 分子量:415.53 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
TAPI-2 | 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
巴氏醋桿菌擬南介金屬離子轉運蛋白(抗原)Anti-FUT3 Antibody人癌標志物-CA153
大腸埃希菌黏膜選址(抗原)Anti-FUNDC1 Antibody人癌標志物-CA153
異常威克漢姆酵母髓鞘相關糖蛋白a/b(抗原)Anti-G3BP2 Antibody人卵巢癌標志物CA125
金針菇髓鞘相關糖蛋白(抗原)Anti-FZD9 Antibody人卵巢癌標志物CA125
大豆慢生根瘤菌基質金屬蛋白-1(小鼠抗原)Anti-G3BP1 Antibody人甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)
Bacillus aryabhattai 中腦核仁蛋白1(抗原)Anti-GAB2 Antibody人甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)
細麗擬盤多毛孢中腦核仁蛋白2(抗原)Anti-GABARAPL2 Antibody人癌胚抗原(CEA/CD66)
蘋果鏈格孢菌一種應激分子抗原Anti-GABBR2 Antibody人癌胚抗原(CEA/CD66)
谷棒桿菌多藥耐藥相關蛋白3(抗原)Anti-GABRA6 Antibody人基質金屬蛋白抑制因子4(TIMP-4)
蠟葉散囊菌多藥耐藥相關蛋白1(抗原)Anti-GABRA4 Antibody人基質金屬蛋白抑制因子4(TIMP-4)
木糖氧化無色桿菌肺耐藥相關蛋白(抗原)Anti-GABRA3 Antibody人基質金屬蛋白抑制因子3(TIMP-3)
紅色鏈孢囊菌間皮(多肽抗原)Anti-GABRB1 Antibody人基質金屬蛋白抑制因子3(TIMP-3)
小柄凸臍蠕孢MSH2抗原Anti-GABRE Antibody人基質金屬蛋白抑制因子2(TIMP-2)
節桿菌神經激肽B受體(抗原)Anti-GABRD Antibody人基質金屬蛋白抑制因子2(TIMP-2)
總狀毛霉低分子量神經絲蛋白(抗原)Anti-GABRG1 Antibody人抑瘤M(OSM)
敏捷食菌中分子量神經絲蛋白(抗原)Anti-GAK Antibody人抑瘤M(OSM)
溶質載體蛋白家族20成員2抗體地衣形芽孢桿菌人NK/T細胞淋巴瘤細胞
線粒體二羧載體蛋白抗體Herbaspirillumcanariense羅猴胎腎細胞
溶質轉運蛋白家族44成員1抗體Herbaspirillumaurantiacum高轉移人肝癌細胞
突觸結合蛋白1抗體Herbaspirillumsoli白介-2轉染耐VP16絨癌細胞
MMP/TACE和ADAM抑制劑(TAPI-2)禾赤鐮孢 苦杏仁苷
中國漢納酵母 氫
葡萄座腔 1-氨基-2-萘-4-磺酸
云芝 黃芩苷
水研處硝酸鹽還原 葛根
柳樹漆斑病 柚皮苷
栗疫 固酮
孟氏假單胞 6-正基-2-硫代
沙地青霉 甲基環戊烯酮
釀酒酵母 芘
棘腐霉 尿酸
黃曲霉 鞣花酸
嗜松青霉 阿魏酸乙酯
肺形側耳,平菇 松香酸
白絲倫茨氏 安息香膠