詳細介紹
商品介紹:
Droxinostat(NS41080)是HDAC3,HDAC6和HDAC8抑制劑,IC50分別為16.9,2.47和1.46μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:99873-43-5 別名:NS 41080 純度:98.86% 分子量:243.69 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Droxinostat | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
枯草芽孢桿菌Propionibacterium jensenii大鼠白介1β (IL-1β)
暗黃類諾氏菌Bifidobacterium minimum大鼠肌紅蛋白(MYO/MB)
不解糖假蒼白桿菌Bifidobacterium thermophilum大鼠肌紅蛋白(MYO/MB)
草青霉Propionibacterium freudenreichii subsp. freudenreichii大鼠血栓B2(TXB2)
尖孢鐮孢Propionibacterium jensenii大鼠血栓B2(TXB2)
白球擬酵母Bifidobacterium cuniculi大鼠乙酰(Ach)
紅球菌Bifidobacterium pullorum大鼠乙酰(Ach)
泛枝芽孢桿菌Bifidobacterium ruminantium大鼠促甲狀腺釋放激(TRH)
枯草芽胞桿菌枯草亞種Bifidobacterium angulatum大鼠促甲狀腺釋放激(TRH)
釀酒酵母Pantoea agglomerans大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)
草青霉Bifidobacterium animalis subsp. Animalis大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)
雞傷寒沙門氏菌Bifidobacterium subtile大鼠促腎上皮質激釋放激(CRH)
解脂亞羅酵母Bifidobacterium asteroides大鼠促腎上皮質激釋放激(CRH)
立枯絲核菌Bifidobacterium boum大鼠促性腺激釋放激(GnRH)
大腸埃希氏菌Bifidobacterium merycicum大鼠促性腺激釋放激(GnRH)
枯草芽孢桿菌Bifidobacterium gallicum大鼠白三烯B4(LTB4)
視黃脫氫10抗體長裙竹蓀Fusarium verticillioides
核糖1,5二磷羧化抗體金頂側耳(榆黃蘑)Massilia dura sp. nov.
抑癌基因PDLIM4抗體短裙竹蓀Massilia sp.
RAS抑制蛋白1抗體云芝栓孔菌(云芝)Stachybotrys chlorohalonata
HDAC3/HDAC6和HDAC8抑制劑(Droxinostat)細曲霉 聚葡萄糖
漏斗狀側耳 槲皮-7-O-葡萄糖苷
谷棒桿 熒光標記親合
病鏈霉 脫水內酯
綠產色鏈霉 抗性淀粉
深層王祖農氏 D(十)-無水葡萄糖
平菇 國產石蠟
大腸埃希
運動節桿 國產石蠟
糙皮側耳 阿魏酸乙酯
大腸埃希氏 國產石蠟
暗黃指孢囊 果膠
兩型蠟蚧 遼東楤木皂苷VII
綠色木霉 D-阿伯糖
食托居真細 遼東楤木皂苷X