EGFR抑制劑(Sapitinib)公司*的產品：phospho-IKK alpha (Tyr463) /FITC 熒光標記化核因子κB激alpha抑制劑抗體IgG苯汞 分析標準品（劇品）
phospho-IKK alpha (Ser176 + Ser180) /FITC 熒光標記化核因子κB激alpha抑制劑抗體IgG2,4,6-三(二氨) 95%
Phospho-IKK alpha/

產品屬性：

中文名稱：EGFR抑制劑(Sapitinib)

英文名稱：Sapitinib

產品規格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

發貨周期：1～3天
公司產品僅用于科研

商品介紹：

細胞生物學研究有以下幾個方面：

細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：

①細胞核、染色體以及基因表達的研究；

②生物膜與細胞器的研究；

③細胞骨架體系的研究；

④細胞增殖及其調控；

⑤細胞分化及其調控；

⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細胞的起源與進化；

⑧細胞工程.

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

腐皮殼屬大鼠腦腸肽Anti-RPA32 Antibody人羥脯(Hyp)

無人抗髓鞘相關糖蛋白抗體Anti-RPAP2 Antibody人羥脯(Hyp)

木霉屬小鼠血清淀粉樣蛋白AAnti-RPA4 Antibody人一氧化氮(NO)

薛瓦酵母小鼠抗中性粒/中心體抗體Anti-RPC2 Antibody人一氧化氮(NO)

長枝木霉大鼠6前列腺Anti-RPL10 Antibody人上皮中性粒活化肽78(ENA-78/CXCL5)

玉米乳桿菌人抗中性粒顆粒抗體Anti-RPL10 Antibody人上皮中性粒活化肽78(ENA-78/CXCL5)

根瘤菌人抗中性粒抗體Anti-RPH3A Antibody人維生C(VC)

煉乳假絲酵母小鼠結合珠蛋白/觸珠蛋白Anti-RPL12 Antibody人維生C(VC)

大腸埃希菌大鼠載脂蛋白A1Anti-RPL10L Antibody人維生B6(VB6)

猴頭菇大鼠載脂蛋白B100Anti-RPL17 Antibody人維生B6(VB6)

雙色牛肝菌Hpt/HP小鼠16α羥基雌1Anti-RPL15 Antibody人可溶性P選擇(sP-selectin)

長雙歧桿菌嬰兒亞種人抗載脂蛋白抗體A1Anti-RPL12 Antibody人可溶性P選擇(sP-selectin)

大腸埃希氏菌小鼠α1性糖蛋白Anti-RPL18 Antibody人基質金屬蛋白抑制因子1(TIMP-1)

擬莖點霉大鼠25羥基維生D3Anti-RPL14 Antibody人基質金屬蛋白抑制因子1(TIMP-1)

北見微桿菌人抗胰島受體抗體Anti-RPL26L1 Antibody人維生D(VD)

球毛殼菌人抗胃壁抗體Anti-RPL27A Antibody人維生D(VD)

四分子交聯體20抗體四旋蛋白銅綠假單胞菌(綠膿桿菌)乳腺癌耐藥細胞

T細胞急性淋巴細胞性白血病1蛋白/淋巴瘤蛋白5抗體聚生殼菌人膽管癌耐藥細胞株

胚胎干細胞相關蛋白TXNDC9抗體澳型核果褐腐病菌（斜面）人乳腺癌表柔比星耐藥細胞株

轉錄因子9抗體柿葉輪斑病菌人白血病HL-60細胞耐藥細胞株
EGFR抑制劑(Sapitinib)楊鏈格孢 Na-苯甲酰-L-精乙酯鹽酸鹽

淺灰北里孢 復合氨基酸粉

焦曲霉 6-氨基正己酸

變位艾耳球蟲 磷脂酰絲

黃白側耳 甘乙酯鹽酸鹽

米曲霉 甘甲酯鹽酸鹽

雞傷寒沙門氏 雙甘氨肽

釀酒酵母 馬尿酸-L-苯

畢赤酵母屬 馬尿酸

卷曲鏈霉 BOC-甘

黃黃色桿 甘

黑曲霉 肌

枯草芽孢桿 L-(-)樟腦磺酸

甲基桿屬 D(-)樟腦磺酸

酮丁梭 牛磺酸 

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)