公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:EGFR抑制劑(Canertinib dihydrochloride)
英文名稱:Canertinib dihydrochloride
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
Canertinib dihydrochloride(CI-1033;PD-183805)是有效地,不可逆的EGFR抑制劑;抑制細(xì)胞EGFR和ErbB2自身磷酸化的IC50值分別為7.4和9nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):289499-45-2 別名:Canertinib;CI-1033 dihydrochloride;PD-183805 dihydrochloride 純度:98.49% 分子量:558.86 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
脫葉鏈霉菌DNA甲基轉(zhuǎn)移-3α(抗原)Anti-FASTKD3 Antibody人高分子量角蛋白(CK-HMW)
卷枝毛霉周期 C(抗原)Anti-FBL Antibody人高分子量角蛋白(CK-HMW)
埃里希正青霉降鈣基因相關(guān)肽Anti-FBXL13 Antibody人肝癌抗原(PHC)
燼灰吸水鏈霉菌Anti-FBL Antibody人肝癌抗原(PHC)
粟酒裂殖酵母色P450單氧化(多肽抗原)Anti-FBXO4 Antibody人凋亡蛋白激活因子1(Apaf-1)
光硬皮馬勃脫羧蛋白體36 cxorf36抗原Anti-FBXO43 Antibody人凋亡蛋白激活因子1(Apaf-1)
路普康湖冷桿菌(DTX1) (Deltex protein 1)抗原Anti-FBXO7 Antibody人鼻咽癌(NPC)
指狀青霉DISC1 N端抗原Anti-FBXW11 Antibody人鼻咽癌(NPC)
Paraconiothyrium hawaiiense DISC1 C端抗原Anti-FCGR1A Antibody人膀胱癌抗原(UBC)
串珠鐮孢DR3 死亡受體(抗原)Anti-FCRL5 Antibody人膀胱癌抗原(UBC)
白地霉人瘤病16型E7蛋白抗原Anti-FEN1 Antibody人廣譜角蛋白(P-CK)
耐久腸球菌表皮生長因子受體(抗原)Anti-FFAR4 Antibody人廣譜角蛋白(P-CK)
科恩根霉天冬蛋白家族蛋白(水稻蛋白的一種)(抗原)Anti-FFAR3 Antibody人癌基因蛋白質(zhì)p190/bcr-abl
固氮菌一種新型的胰島因子(抗原)Anti-FFAR4 Antibody人癌基因蛋白質(zhì)p190/bcr-abl
枯草芽孢桿菌脂肪結(jié)合蛋白2(抗原)Anti-FGF11 Antibody人膀胱腫瘤抗原(BTA)
釀酒酵母食道癌相關(guān)基因(抗原)Anti-FGF16 Antibody人膀胱腫瘤抗原(BTA)
斯鈣2抗體香蕉枯萎病人低侵襲性脈絡(luò)膜黑色瘤細(xì)胞
分選連接蛋白4抗體蠟蚧輪枝孢菌綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠前胃癌細(xì)胞
分選連接蛋白9抗體痢疾志賀氏菌人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞
分選連接蛋白10抗體宋氏志賀氏菌人子宮內(nèi)膜腺癌(轉(zhuǎn)移)細(xì)胞
EGFR抑制劑(Canertinib dihydrochloride)黃曲霉 十八
根瘤 氨
香菇 亞硫基二乙酸
綠毛殼 叔丁基對(duì)苯二
產(chǎn)氣莢膜梭 A型 DEPC水
紅曲霉 2,3,5-三
克魯斯假絲酵母 牛磺脫氧膽酸鈉
香草蘭根疾 丁香酸
黑木耳 丁香
秦氏蜜環(huán) 磷鉬酸鈉
黃曲霉 亞磷酸氫二鈉五水合物
大腸埃希 苯酮酸鈉
枯草芽孢桿 D-泛酸鈉
發(fā)酵乳桿 草鈉
Rhizobium alkalisoli 鄰苯二甲酸氫鈉