詳細介紹
產品屬性:
中文名稱:Toll樣受體(TLRs)抑制劑
英文名稱:E6446 dihydrochloride
產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
E6446是Toll樣受體(TLRs)抑制劑,HEK:TLR9細胞中IC50值為10nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1345675-25-3 別名:E-6446 dihydrochloride 純度:99.44% 分子量:522.51 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
貝倫格葡萄座腔菌癌易感基因2相關蛋白抗體Human FOXJ3 ELISA Kit豚鼠抗利尿激/血管加壓/精加壓(ADH/VP/AVP)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌磷化癌易感基因1抗體Human FOXO6 ELISA Kit豚鼠巨噬移動抑制因子(MIF)免疫試劑盒
微黃漢納酵母磷化癌易感基因1抗體Human FOXJ3 ELISA Kit豚鼠巨噬集落激因子(M-CSF)免疫試劑盒
豬丹絲菌磷化上皮鈣粘附分子抗體Human FOXH1 ELISA Kit豚鼠降鈣基因相關肽(CGRP)免疫試劑盒
硬結節桿菌磷化癌易感基因1抗體Human FOXP1 ELISA Kit豚鼠基質金屬蛋白抑制因子1(TIMP-1)免疫試劑盒
大腸桿菌屬BRD2蛋白抗體Human FOXO4 ELISA Kit豚鼠基質金屬蛋白9(MMP-9)免疫試劑盒
pcDNA6/V5-His ABRD3蛋白抗體Human FOXL2 ELISA Kit豚鼠黃體激(LH)免疫試劑盒
叢花青霉磷化酪蛋白激6/腫瘤激抗體Human FOXO6 ELISA Kit豚鼠環磷腺苷(cAMP)免疫試劑盒
棉花新鞘菌磷化蛋白酪激ATK抗體Human FOXP1 ELISA Kit豚鼠環磷鳥苷(cGMP)免疫試劑盒
多主葡萄殼菌磷化EGF應答因子1抗體Human FOXP2 ELISA Kit豚鼠過氧化脂質/乳過氧化物(LPO)免疫試劑盒
短密青霉β抗體Human FNTB ELISA Kit豚鼠鉤端螺旋體IgG(Leptospira)免疫試劑盒
黑曲霉磷化BH3結構域凋亡誘導蛋白抗體Human FOSL2 ELISA Kit豚鼠肝生長因子(HGF)免疫試劑盒
香菇ARF鳥苷交換因子BIG1抗體Human FN3K ELISA Kit豚鼠甘油-3-磷脫氫(GAPDH)免疫試劑盒
黑曲霉腦特異性同源蛋白BSX抗體Human FIP1L1 ELISA Kit豚鼠干因子/肥大生長因子(SCF/MGF)免疫試劑盒
釀酒酵母鋅指蛋白47抗體Human FIGNL1 ELISA Kit豚鼠鈣調(CAM)免疫試劑盒
梨輪紋病菌?BTBD14A蛋白抗體Human FIS1 ELISA Kit豚鼠端粒(TE)免疫試劑盒
多殺性巴氏桿菌Pasteurella│multocida 質量規格:>98%,BRα2抗纖溶試劑盒去氧穿心蓮內酯
苜蓿中華根瘤菌Sinorhizobium│meliloti 質量規格:>98%,BRα2巨球蛋白試劑盒羥基芫花
絲核菌屬Rhizoctonia│sp. 質量規格:>98.5%,BRα2-HS糖蛋白試劑盒7-羥基馬兜鈴A
Toll樣受體(TLRs)抑制劑自然銅(醋煅)(標準品)英文名稱: Apraclonidine hydrochloride神經組織特異性F肌動蛋白結合蛋白抗體包裝5g
棕櫚(標準品)英文名稱: Tazarotene胞內活化的Notch1蛋白抗體包裝100g
棕矢車菊(標準品)英文名稱: Tazarotene神經鈣傳感蛋白1抗體包裝25g
走馬胎(標準品)英文名稱: Ganoderic acid D神經元鈣結合相關蛋白EFCBP1抗體包裝5g
祖師麻(唐古特瑞香)(標準品)英文名稱: Levoceitrizine HCl膜相關蛋白樣蛋白NUMBL抗體包裝1g
鉆山風(標準品)英文名稱: Levoceitrizine HCl嘌呤霉敏感性肽蛋白抗體包裝5g
醉椒英文名稱: Cetirizine HydrochlorideN-乙基順二酰亞敏感融合蛋白抗體包裝100mg
醉魚草皂苷IVb(標準品)英文名稱: Ramosetron hydrochlorideNIPAL2蛋白抗體包裝10mg
多巴(標準品)英文名稱: Etodolac神經營養因子HNT抗體包裝25mg
樟腦(標準品)英文名稱: Amfebutamone Hydrochloride軸突蛋白1β/Neurexin 1β抗體包裝25g
端羥基聚(乳-羥基乙75/25)共聚物(重均分子量...英文名稱: rosiglitazone hydrochloride谷受體3A抗體包裝5g
端羥基聚乳乙共聚物50/50(重均分子量0.5-...英文名稱: BENZBROMARONE谷受體3B抗體包裝1g
端羥基外消旋聚乳(重均分子量0.5-1.5萬)英文名稱: Butenafine HCl谷受體3A+3B抗體包裝5g
端羥基外消旋聚乳(重均分子量1.5-3萬)英文名稱: Tropisetron hydrochlorideP53誘導凋亡抑制蛋白α抗體包裝1g
端羥基外消旋聚乳(重均分子量109-150萬)英文名稱: Tropisetron hydrochloride胞質5'核苷1A抗體包裝250mg
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)