詳細介紹
商品介紹:
PF-04957325是一種高效的選擇性的PDE8抑制劑,對PDE8A和PDE8B的IC50值分別為0.7nM和小于0.3nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1305115-80-3 純度:98.48% 分子量:400.38 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
PF-04957325 | 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
香栓孔菌RAS相關GTP結合蛋白C抗體Anti-Desmin Antibody載脂蛋白L4(APOL4)
加州鏈霉菌R-鈣粘附分子抗體Anti-DGAT1 Antibody載脂蛋白L3(APOL3)
木賊鐮孢ras癌基因家族RAB8B抗體Anti-DGCR8 Antibody載脂蛋白L2(APOL2)
嗜堿海螺菌Ras樣蛋白B抗體Anti-DGKZ/DGK-zeta Antibody載脂蛋白H(APOH)
膠紅酵母視網膜母瘤相關蛋白p130抗體Anti-DHODH Antibody(PB1112)載脂蛋白F(APOF)
枯草芽胞桿菌維甲誘導蛋白17抗體Anti-DHX9 Antibody載脂蛋白E(APOE)
蘋果鏈格孢菌RAN GTPase激活蛋白1抗體Anti-DHFR Antibody(PB0133)載脂蛋白D(APOD)
大腸埃希菌減數分裂重組蛋白家族REC8抗體Anti-DHX15 Antibody載脂蛋白C4(APOC4)
盤長孢狀盤孢視黃脫氫2型抗體Anti-DICER1 Antibody載脂蛋白C3(APOC3)
金黃色葡萄球菌金黃亞種再生基因蛋白4抗體Anti-DIO1 Antibody載脂蛋白C2(APOC2)
卡利比克邁耶氏酵母受體轉運蛋白3抗體Anti-DIABLO Antibody載脂蛋白C1(APOC1)
季也蒙畢赤酵母G蛋白信號調節蛋白21抗體Anti-DIS3 Antibody載脂蛋白B48(APOB48)
茶炭疽病再生基因蛋白4抗體Anti-DISC1 Antibody載脂蛋白B100(APOB100)
枯草芽孢桿菌受體相互作用蛋白激1抗體Anti-DISC1 Antibody載脂蛋白B(APOB)
大腸埃希氏菌(大腸桿菌)RB1的誘導卷曲蛋白RB1CC1抗體Anti-DKK1 Antibody載脂蛋白A5(APOA5)
綠僵菌環指蛋白211抗體Anti-DLD Antibody載脂蛋白A4(APOA4)
人蒼白桿菌Ochrobactrum│anthropi 質量規格:含量97%-103%,標準品
紅褐曲霉Aspergillus│rutilans 質量規格:>97%
黑曲霉Aspergillus│niger 質量規格:>99%,BR
PDE8抑制劑(PF-04957325)產紅青霉 CHO培養基基礎轉化生長因子βElisa
基簡馬杜拉放線 SCHAEDLER瓊脂轉化生長因子β1Elisa
尿腸球 Campy-Cefex瓊脂基礎轉鐵蛋白Elisa
褐紅小孔 2,5-二吡啶轉鐵蛋白受體Elisa
蘇云金芽孢桿蠟螟亞種 Campy-Cefex添加劑總蛋白Elisa
平菇 Nα-甲酰基-DL-色氨酸總抗氧化能力Elisa
托姆青霉 L-1,4-二硫代蘇糖阻抑Elisa
豌豆根瘤 4-甲基組Elisa
黑曲霉 (S)-(-)-環氧烷組織因子Elisa
玉米乳桿 三(二基)膦腦磷脂Elisa
假單胞 二環己烷并18-冠-6卵磷脂Elisa
黃肉座 2,2'-(2-丁炔-1,4-二基二氧)二乙(含約的異構體)心磷脂Elisa
樟疫霉 苯基三乙基溴化銨鞘磷脂Elisa
解脂假絲酵母 單硝酸異山梨酯偽狂犬病病GPIElisa
香菇 2-氨基-5-內皮型一氧化氮合Elisa