詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
中文名稱:RET激酶抑制劑(AST 487)
英文名稱:AST 487
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發貨周期:1~3天
商品介紹:
AST487是一種RET激酶抑制劑,IC50為880nM,抑制RET自磷酸化,及下游效應器激活,也抑制Flt-3,IC50為520nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:630124-46-8 別名:NVP-AST 487 純度:98.64% 分子量:529.56 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
短小芽孢桿菌羅丹明標記人IgAAnti-KDELR3 Antibody人水痘帶狀皰疹病IgM(VZV-IgM)
枯草芽孢桿菌羅丹明標記猴IgGAnti-KDR Antibody人水痘帶狀皰疹病IgM(VZV-IgM)
熱淀粉鏈霉菌羅丹明標記猴IgMAnti-KDM4B Antibody人水痘帶狀皰疹病IgG(VZV-IgG)
慢生根瘤菌羅丹明標記小鼠IgMAnti-KEL Antibody人水痘帶狀皰疹病IgG(VZV-IgG)
pMD2.G羅丹明標記豬IgGAnti-KDR Antibody人軍團菌抗體IgA(LP Ab-IgA)
日本山茶盤孢羅丹明標記水貂IgGAnti-KDR Antibody人軍團菌抗體IgA(LP Ab-IgA)
微小桿菌羅丹明標記兔IgMAnti-KIF13B Antibody人軍團菌抗體IgM(LP Ab-IgM )
節桿菌羅丹明標記大鼠IgMAnti-KIAA0100 Antibody人軍團菌抗體IgM(LP Ab-IgM )
水稻漢納酵母羅丹明標記重組人白介-1受體拮抗劑Anti-KIF20B Antibody人軍團菌抗體IgG(LP Ab-IgG)
米根霉羅丹明標記豬胰島蛋白Anti-Kinesin-1 Antibody人軍團菌抗體IgG(LP Ab-IgG)
玫紅假裸囊菌羅丹明標記血藍蛋白Anti-KIR2DL1 Antibody人腮腺炎病IgM
醋桿菌屬羅丹明標記雞卵白蛋白Anti-KIR2DL5A Antibody人腮腺炎病IgM
病研所芽孢桿菌羅丹明標記胰糜蛋白Anti-KIR2DL5B Antibody人腮腺炎病IgG
Marisediminicola熒光標記人胰島蛋白Anti-KIR3DL1 Antibody人腮腺炎病IgG
死亡谷芽孢桿菌金標記羊抗人IgA(10nm/15nm)Anti-KIR2DL5B Antibody人EB病IgM(EBv IgM)
產朊假絲酵母金標記兔抗人IgA(10nm/15nm)Anti-KIR3DL2 Antibody人EB病IgM(EBv IgM)
ras癌基因家族Rab3A--Rab3D抗體毛木耳(紫木耳、黃背木耳)tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類)
G蛋白P21RAC2抗體發光假蜜環菌人乳腺癌細胞(穩轉pTet-on質粒)
ras癌基因家族RAB20抗體膠紅酵母人肺巨細胞癌高轉移系
Ras樣蛋白A+B抗體小紅酵母人腦多型膠質母細胞瘤細胞
RET激酶抑制劑(AST 487)葡萄座腔 二乙酸長葉九里香內酯二酯
環狀芽孢桿 楊梅
蠟樣芽孢桿 九里香亭,九里香,長葉九里香內酯二
解脂假絲酵母 九里香
畢赤酵母 桑根皮
雜色云芝 Moracin O
黑曲霉 Momor-腦苷脂I
產朊假絲酵母 小蕓木香豆精
釀酒酵母 米內苷
芽孢桿 甲基赤芝萜酮
地衣芽孢桿 迷迭香酸甲酯
黑單Au(單片木耳) Methyl lycernuate A
黑曲霉 Methyl eichlerianate
海水科維爾氏 二萜酸甲酯
蘇云金芽胞桿九州亞種 Mearnsitrin