詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Tariquidar | 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
Tariquidar是一種有效的特異性P-glycoprotein(P-gp)抑制劑,Kd為5.1±0.9nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:206873-63-4 別名:XR9576 純度:98.57% 分子量:646.73 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
松口蘑衰老標記蛋白30抗體Anti-Cytochrome P450 1A2/Cyp1a2 Antibody著絲粒蛋白E(CENPE)
枯草芽胞桿菌環指蛋白56Anti-DAPK1 Antibody著絲粒蛋白B(CENPB)
膜醭畢赤酵母受體活性修飾蛋白1抗體Anti-CYP7A1 Antibody著絲粒蛋白36(CENP36)
黑乳菇胞內接頭蛋白P14抗體Anti-Cyt 19/As3mt Antibody著絲粒蛋白32(CENP32)
約氏不動桿菌RNA結合蛋白X-連鎖蛋白2抗體Anti-DAPK2 Antibody蔗糖異麥芽糖(SI)
產氣莢膜梭菌 C型視網膜母瘤相關蛋白p130抗體Anti-DAXX Antibody遮蔽蛋白(OBSCN)
折疊馬賽菌磷化A-Raf抗體Anti-DAXX Antibody張力蛋白3(TNS3)
大腸埃希氏菌環指蛋白10抗體Anti-DAXX Antibody張力蛋白2(TNS2)
藍色犁頭霉RAN結合蛋白2/核孔蛋白抗體Anti-DARS2 Antibody張力蛋白1(TNS1)
聚貪噬菌環指蛋白11抗體Anti-DAZAP1 Antibody粘脂蛋白3(MCOLN3)
蘇云金芽孢桿菌性核糖體磷蛋白P2抗體Anti-DBI Antibody粘脂蛋白2(MCOLN2)
彈性馬鞍菌腫瘤相關表面抗原RCAS1抗體Anti-DBF4 Antibody粘脂蛋白1(MCOLN1)
植物乳桿菌植物亞種心肌蘭尼堿受體抗體(腦肌蘭尼堿受體)Anti-DAZL Antibody粘著斑激(FAK)
松鼠葡萄球菌松鼠亞種RASSF5抗體Anti-DBP Antibody粘膜關聯上皮趨化因子(MEC)
蒼白桿菌環指蛋白93抗體Anti-DBH Antibody粘蛋白7(MUC7)
喜熱單胞菌屬環指蛋白111抗體Anti-DCC Antibody粘蛋白6(MUC6)
蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質量規格:>90%(T),BR
蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質量規格:0.98
唐菖蒲伯克霍爾德氏菌Burkholderia│gladioli 質量規格:BR
P糖蛋白抑制劑(Tariquidar)海水球 艾格瓊脂瘟病IgA抗體Elisa
孢籃狀 TM培養基瘟病IgG抗體Elisa
白黃阮繼生氏 DL-泛瘟病IgM抗體Elisa
彎孢 2-環己酮甲酸乙酯瘟抗體Elisa
異常威克漢姆酵母 假單胞分離肉湯間粘附分子1Elisa
糙卷霉 肌測定培養基纖連蛋白Elisa
類食品乳桿 酸性肉湯性結合球蛋白Elisa
魯毛霉 煙酸測定培養基雄烯二酮Elisa
淺黃曲霉 維生B12測定用培養基雄烯酮Elisa
香菇 測定培養基血管緊張1-7Elisa
豇豆慢生根瘤 泛酸測定培養基血管緊張??Elisa
薛瓦酵母 游離生物測定培養基血管內皮生長因子Elisa
大腸埃希 2-酸血管內皮粘附分子1Elisa
卵孢木霉 二環己基化膦血管生成1Elisa
紅緣層孔 氣單胞培養基基礎血管生成2Elisa