詳細介紹
商品介紹:
EMD1214063是高活性c-Met選擇性抑制劑,IC50為4nM,比對IRAK4,TrkA,Axl,IRAK1和Mer的抑制性高200倍以上。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1100598-32-0 別名:Tepotinib 純度:99.80% 分子量:492.57 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
產品屬性:
英文名稱:EMD-1214063
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
鏈球菌(不定種)熒光Cy3標記豬胰島蛋白Anti-JDP2 Antibody人麻疹病(MV)
多粘類芽孢桿菌(免疫親和純化) 小鼠IgGAnti-JTB Antibody人麻疹病(MV)
橄欖色盾殼霉小鼠IgM (免疫親和純化)Anti-JUNB Antibody人流行性腮腺炎(EP)
飛禽島海草球菌(親和純化) 猴IgMAnti-JUN Antibody人流行性腮腺炎(EP)
大腸埃希氏菌Alexa Fluor 350標記小鼠IgG(流式同型對照)Anti-KAT2A Antibody人抗流行性出血熱病抗體IgG (EHF)
石竹伯克霍爾德氏菌Alexa Fluor 555標記小鼠IgG(流式同型對照)Anti-KANK2 Antibody人抗流行性出血熱病抗體IgG (EHF)
Cecembia兔抗小鼠IgA抗血清Anti-JUND Antibody人痢疾內阿米巴抗原
Paenochrobactrum glacieiAlexa Fluor 647標記小鼠IgG(流式同型對照)Anti-KAT2B Antibody人痢疾內阿米巴抗原
禾稈鐮孢霉熒光Cy5.5標記小鼠IgG(流式同型對照)Anti-KAT2B Antibody人萊姆IgG(Lyme-IgG)
放射型根瘤菌熒光PE標記雞卵白蛋白Anti-KAT5 Antibody人萊姆IgG(Lyme-IgG)
釀酒酵母FITC標記重組金黃色葡萄球菌蛋白AAnti-KAT7 Antibody人空腸彎曲菌黏附蛋白(PEB1)
豬鏈球菌分型血清參考品 血清型 SS16辣根過氧化物標記的重組蛋白GAnti-KAT5 Antibody人空腸彎曲菌黏附蛋白(PEB1)
無花果假單胞菌金標記兔抗熒光 (10nm/15nm)Anti-KAT7 Antibody人衣原體蛋白樣活性因子(CPAF)
細鏈格孢Alexa Fluor 488標記兔IgG(流式同型對照)Anti-KAT8 Antibody人衣原體蛋白樣活性因子(CPAF)
類芽孢桿菌熒光PE-Cy5標記兔IgG(流式同型對照)Anti-KCNA10 Antibody人脊髓灰質炎病IgG(PV-IgG)
蠟狀芽孢桿菌兔IgG(親和層析純化)Anti-KCNA5 Antibody人脊髓灰質炎病IgG(PV-IgG)
ras基因相關蛋白Rab24抗體擲抱酵母人霍奇金淋巴瘤細胞
Ras相關雌激調節生長抑制蛋白栗酒裂殖酵母人間變性大細胞
RAS家族關聯結構域蛋白8抗體路德類酵母人視網膜微血管內皮細胞
腫瘤抑制基因LUCA15抗體威爾酵母大鼠膝關節退變軟骨細胞
c-Met抑制劑(EMD-1214063)肺炎克雷伯氏 Oleonuezhenide
阿穆爾斯克灣鹽地桿 3-(2-羥基苯基)-2-烯
枯草芽孢桿 奧多諾甙 H
亞歷山大富鹽 O-Acetylcyclocalopin A
紫色直絲鏈霉 去甲絡石甙元
豬鏈球 去甲布易林
皮狀假絲酵母 N-Methylflindersine
冠突曲霉 N-反式-阿魏酰低聚糖-3-甲氧基酪
燕麥食酸燕麥亞種 夾竹桃它羅苷
黑腐皮殼 歐奕二烯酮 B
秦氏蜜環 Neoechinulin A
球孢傘霉 柚皮
低平101 三乙酸柚皮酯
銅綠假單胞 Nagilactone C
黑曲霉 Myricetin 3-O-galactoside