詳細介紹
商品介紹:
Rilpivirine(R278474,TMC278)是HIV的非核苷逆轉錄酶抑制劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:500287-72-9 別名:R278474;TMC278 純度:98.89% 分子量:366.42 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
產品屬性:
中文名稱:HIV非核苷逆轉錄酶抑制劑(Rilpivirine)
英文名稱:Rilpivirine
產品規格:1mL(10mM)|10mg|50mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
蟲草(標準品)英文名稱: ZSTK474;ZSTK-474整合α3抗體包裝5g
臭靈丹(標準品)英文名稱: Luteolin 7-O-glucuronide整合β5抗體包裝1g
臭梧桐葉(標準品)英文名稱: Ganetespib整合α1抗體包裝250mg
川貝母(標準品)英文名稱: Lucidenic acid D白介2受體β鏈抗體 IL-2Rβ包裝5g
川陳皮(標準品)英文名稱: DAPT (GSI-IX)干擾α2b抗體包裝25ml
川燈心草(標準品)英文名稱: Lucidenic acid E誘導協同激分子配體CD275抗體包裝5ml
川楝(標準品)英文名稱: Licofelone雞傳染性法氏囊病病抗體包裝100g
川楝子(標準品)英文名稱: Ganoderenic acid C白介-17抗體包裝25g
川麥冬苷A英文名稱: Biocytin5'肌苷磷脫氫2抗體包裝100g
川木通(標準品)英文名稱: PUH71即刻早期應答基因5樣蛋白抗體包裝25g
川木香(標準品)英文名稱: Orotic acid整合αV抗體包裝500g
川牛膝(標準品)英文名稱: Niflumic acid白介-19抗體包裝25g
川射干(標準品)英文名稱: XYLAN白介3抗體包裝5g
川烏(標準品)英文名稱: Atrazine白介3受體a鏈抗體包裝250mg
川西獐牙菜(標準品)英文名稱: Bufexamac白介-5受體α鏈抗體IL-5Rα包裝1g
: E-3資源名稱: O1群霍亂弧菌 質量規格:HPLC>98.5%,標準品可溶性補體激活產物SC5b9 ELISA Kit黃豆黃;Glycitein
紫色鏈霉菌Streptomyces│violaceus 質量規格:>99%可溶性白介7受體試劑盒黃芪皂苷II;astragaloside
蕓薹鏈格孢Alternaria│brassicae (Berk.) Sacc. 質量規格:>98%,分析標準品可溶性P選擇試劑盒黃芪皂苷III;Astragalosid
HIV非核苷逆轉錄酶抑制劑(Rilpivirine)有絲分裂控制樣蛋白DIS3L抗體鹽金剛乙(標準品) Yohimbine HCl
有絲分裂控制蛋白樣DIS3L2抗體鹽金霉(標準品) Phentolamine mesilate
DOM3Z蛋白抗體鹽肼屈(標準品) Phentolamine mesilate
蓬亂蛋白2抗體鹽卡替洛爾(標準品) Vemurafenib,PLX 4032
磷化蓬亂蛋白2抗體鹽克林霉(標準品) Praeruptorin E
轉錄下調蛋白1抗體鹽喹那普利(標準品) Praeruptorin A
脫氫/還原家族成員2抗體鹽拉貝洛爾(標準品) trans-Zeatin
牙本質磷蛋白抗體鹽雷莫司瓊(標準品) Dipotassium tetrachloroplatinate
Dermokine β蛋白抗體鹽雷尼替丁(標準品) Cycloastragenol