詳細介紹
商品介紹:
Lonidamine是己糖激酶抑制劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:50264-69-2 別名:DICA;Diclondazolic Acid;AF1890 純度:95.45% 分子量:321.16 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
產品屬性:
中文名稱:己糖激酶抑制劑(Lonidamine)
英文名稱:Lonidamine
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
柴油食烷菌(親和純化) 牛IgGAnti-ISL2 Antibody人抗型肝炎病抗體(anti-HCV)
細麗外擔菌熒光標記牛血清白蛋白Anti-ITGA2 Antibody人抗型肝炎病抗體(anti-HCV)
核盤菌羅丹明標記牛血清白蛋白Anti-ITPKA Antibody人抗斑疹傷寒抗體(anti-typhus-Ab)
Phaeobotryon羅丹明標記狗IgMAnti-ITGAD Antibody人抗斑疹傷寒抗體(anti-typhus-Ab)
Microbacterium halotolerans熒光Cy3標記狗IgMAnti-ITIH2 Antibody人單核增多性李斯特菌O((LLO)
釀酒酵母熒光PE標記狗IgGAnti-ITPK1 Antibody人單核增多性李斯特菌O((LLO)
黑曲霉兔抗熒光Anti-ITPKC Antibody人乙型肝炎病X抗原(HBxAg)
巧克力糖霉菌羊IgGAnti-JAK2 Antibody人乙型肝炎病X抗原(HBxAg)
黃曲霉辣根過氧化物標記羊抗人IgAAnti-ITPKB Antibody人腺相關病(AAV)
冠突曲霉熒光APC標記羊IgG(流式同型對照)Anti-JAK1 Antibody人腺相關病(AAV)
鞘單胞菌(加詞待譯)羅丹明標記人血白蛋白Anti-JAK2 Antibody人乙型肝炎病X蛋白相互作用蛋白(HBXIP)
無花果曲霉(免疫親和純化)人IgMAnti-JAKMIP2 Antibody人乙型肝炎病X蛋白相互作用蛋白(HBXIP)
枯草芽孢桿菌兔抗HRPAnti-JAK3 Antibody人傷寒抗原(St-Ag)
秀珍菇(親和純化) 人IgGAnti-JAK2 Antibody人傷寒抗原(St-Ag)
短小芽孢桿菌(親和純化) 人分泌型IgAAnti-JAM A pY280 Antibody人類嗜T淋巴Ⅰ型病(HTLV-Ⅰ)
釀酒酵母生物化人IgGAnti-JMJD5 Antibody 人類嗜T淋巴Ⅰ型病(HTLV-Ⅰ)
環指蛋白40抗體匍匐放射毛霉或雅致放射毛霉HCMEC人心臟微血管內皮細胞
環指蛋白8抗體李克犁頭霉(傘枝梨頭霉)人急性早幼粒白血病細胞
細胞衰老抑制基因蛋白抗體皮狀絲孢酵母大鼠垂體瘤細胞
中間絲相關蛋白抗體貝雷絲孢酵母人急性髓細胞性白血病細胞
己糖激酶抑制劑(Lonidamine)擬黑馬朗假絲酵母 二乙酸松屬酯
棘孢木霉 7-乙酸-5,7-二羥基雙氫黃酮酯
鏈格孢 鴨腳樹葉堿,鴨腳樹葉堿
尖孢鐮孢 商陸皂甙 B
教酒色鏈霉 Phlorin
白盤長孢 環烯萜 B
灰毛茄絨孢(茄子絨斑病) (二氫)黃柏甙
平菇—被氏菇 泡桐
玉蕈(真姬菇) Paniculoside II
高加索酸奶乳桿 圓錐定 C
奧斯陸莫氏 圓錐定B
地衣芽孢桿 李屬
植物乳桿 金粉蕨亭
島生異擔子 Ombuoside
松杉暗孔 橄欖樹脂