詳細介紹
商品介紹:
JNJ-42041935是高效的,競爭性和選擇性的脯氨酰羥化酶PHD抑制劑,抑制PHD1,PHD2,and PHD3的pKi值分別為7.91±0.04,7.29±0.05和7.65±0.09。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1193383-09-3 純度:99.93% 分子量:346.65 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
產品屬性:
中文名稱:脯氨酰羥化酶PHD抑制劑(JNJ-42041935)
英文名稱:JNJ-42041935
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
鹽普拉克索英文名稱: Sodium bismuthate過氧化物體增殖物激活受體γ輔激活子1β抗體包裝500g
鹽普拉克索無英文名稱: Sodium diatrizoate dihydrate過氧化物體增殖物激活受體γ輔激活子1α+β抗體包裝100g
鹽普魯英文名稱: Sodium fluoroaluminate朊病蛋白CD230抗體包裝100g
鹽普羅帕英文名稱: Sodium hippurate孕激受體β(MPRβ)抗體包裝500g
鹽普莫英文名稱: Sodium laurate前列腺F2a受體抗體PGF2αR包裝1g
鹽去羥英文名稱: Sodium metaaluminate泛基賴抗體包裝5g
鹽噻加賓英文名稱: Sodium metavanadate dehydrate核糖體p70 S6蛋白激抗體包裝1g
鹽賽庚啶英文名稱: Sodium n-caprylatep53調節凋亡誘導蛋白1抗體包裝5g
鹽賽洛唑啉英文名稱: Sodium oxamateBcl-2轉錄抑制因子1抗體包裝250g
鹽三拉英文名稱: Sodium phenyl phosphate, dehydrate磷脂爬行3抗體包裝5mg
鹽舍曲林英文名稱: Sodium-2-naphthalenesolfonate骨骼肌線粒體膜蛋白PARL抗體包裝10MG
鹽司來吉蘭英文名稱: Span* 20多核苷磷化蛋白抗體包裝100g
鹽司維拉姆英文名稱: Stains-All胃腸道相關酪激抗體(蛋白酪激5)包裝25g
鹽坦洛新/鹽坦索羅辛英文名稱: Strontium carbonatePEST含核蛋白抗體包裝5g
鹽溴己新英文名稱: Strontium sulfate磷化p53結合蛋白1抗體包裝1g
褐紅小孔菌Microporus│affinis (Blume & T. Nees) Kuntze 質量規格:HPLC≥98%,標準品胱抑B試劑盒磺間二氧嘧啶;純品型;標準品;有證書
: 29資源名稱: O1群霍亂弧菌 質量規格:HPLC≥98%,標準品胱抑A試劑盒鹽環沙星;純品型;標準品;有證書
鼠傷寒沙門氏菌Salmonella│typhimurium 質量規格:>99%,BR,可用于培養胱天蛋白激活的脫氧核糖核試劑盒脫氫乙-對照品;有報告
脯氨酰羥化酶PHD抑制劑(JNJ-42041935)轉移生長因子β3抗體(TGFβ3)膽甾烷 CHOLESTAN-3-b-OL, (5a)-(AS)Human, Mouse, Rat
轉移生長因子β受體2抗體(TGF-βRⅡ,TGFβRⅡ)膽甾烷 CHOLESTAN-3-b-OL, (5a)-(AS)Human, Mouse
轉移生長因子β受體1抗體膽甾烷 CHOLESTAN-3-b-OL, (5a)-(AS)Human, Mouse, Rat
狀腺過氧化物抗體膽甾烷 CHOLESTANE, (5a-)-(P)Human
腫瘤壞死因子受體1相關死亡域蛋白抗體膽甾烷 CHOLESTANE, (5a-)-(P)Human
生精凋亡相關因3抗體膽甾烷 CHOLESTANE, 5-ALPHA-(RG)Human
三狀腺T3抗體膽甾烷 CHOLESTANE, 5-ALPHA-(RG)Human, Mouse
按蚊硫酯包含蛋白-1抗體膽甾烷 CHOLESTANE, 5-ALPHA-(RG)Human, Mouse, Rat
端粒結合蛋白P23抗體喹那多/5,7-二-8-羥喹哪啶 CHLORQUINALDOL(RG)Human, Mouse