公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):硫氧還蛋白-1(Trx-1)抑制劑(PX-12)
英文名稱(chēng):PX-12
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
PX-12(IV-2)是可逆的硫氧還蛋白-1(Trx-1)抑制劑;抑制MCF-7和HT-29cells細(xì)胞生長(zhǎng)的IC50值分別為1.9和2.9μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):141400-58-0 別名:IV-2 純度:99.58% 分子量:188.31 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
叢毛紅曲霉BTG2(抗原)Anti-ESPL1 Antibody人TGF-β誘導(dǎo)早期基因1(TIEG1)
香蕉原癌基因蛋白(活化蛋白1)(抗原)Anti-ERN2 Antibody人TGF-β誘導(dǎo)早期基因1(TIEG1)
金耳周期D1(抗原)Anti-ETNK2 Antibody人腫瘤血管生長(zhǎng)因子(TAF)
莫哈韋芽孢桿菌β-酪蛋白(抗原)Anti-ESET Antibody人腫瘤血管生長(zhǎng)因子(TAF)
假單胞菌膽囊收縮/縮膽囊(八肽)Anti-ETS1 Antibody人角蛋白20(CK-20)
黃綠綠僵菌*CD4(抗原)Anti-ETV4 Antibody人角蛋白20(CK-20)
三葉草根瘤菌CD4抗原Anti-EXO1 Antibody人角蛋白19(CK-19)
Acinetobacter soliCD8抗原Anti-EXOG Antibody人角蛋白19(CK-19)
少根根霉原變種CD20(抗原)Anti-ETV6 Antibody人角蛋白18(CK-18)
異常漢遜酵母CD25/白介2-受體(抗原)Anti-EZH2 Antibody人角蛋白18(CK-18)
野牡丹尼爾氏酵母血小板內(nèi)皮黏附分子-1(抗原)Anti-F2RL2 Antibody人嗜鉻蛋白A(CgA)
球孢白僵菌CD34(多肽抗原)Anti-F10 Antibody人嗜鉻蛋白A(CgA)
大腸桿菌神經(jīng)粘附分子1(抗原)Anti-EZR Antibody人視網(wǎng)膜母瘤抑制蛋白(pRB)
芽孢桿菌癌胚抗原相關(guān)粘附分子8Anti-F12 Antibody人視網(wǎng)膜母瘤抑制蛋白(pRB)
黑曲霉CD68抗原Anti-F13B Antibody人生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因α/黑瘤生激因子(GROα/CXCL1/MGSA)
佛雷德里克斯堡假單胞菌干生長(zhǎng)因子受體/表面分化抗原(抗原)Anti-F9 Antibody人生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因α/黑瘤生激因子(GROα/CXCL1/MGSA)
新型分泌細(xì)胞表面蛋白/成骨細(xì)胞相關(guān)蛋白SCUBE3抗體孢囊桿菌人單核細(xì)胞白血病
內(nèi)皮分泌蛋白SCUBE2抗體弱小珊瑚桿菌人原髓細(xì)胞白血病細(xì)胞
清道夫受體STAB2抗體黃色粘球菌人原位胰腺腺癌細(xì)胞
維甲誘導(dǎo)蛋白6抗體產(chǎn)堿假單胞菌小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞
硫氧還蛋白-1(Trx-1)抑制劑(PX-12)產(chǎn)氮假單胞 3-吡啶磺酸
無(wú) 大黃
紅球 二氨荃庚二酸
西藏嗜鹽堿紅 2-甲基乳酸
蘇云金芽孢桿蠟螟亞種 1-(3-)哌鹽酸鹽
青紫黑鏈霉 聚乙烯硫酸
謝瓦曲霉 吡硫鎓鈉
異常漢遜酵母 β-內(nèi)酯
丁香直絲鏈霉 3-羥基丁酸
細(xì)交鏈孢 5-氨基頡草酸
沃氏富鹽 吩乙基硫酸鹽
南海棲砂桿 四基
黃傘 6-溴乙酸
枯草芽孢桿 磷酸烯酮酸三環(huán)已鹽
榮州假黃單胞 磷酸烯酮酸單鹽