詳細介紹
產品屬性:
中文名稱:PDK1激動劑(PS48)
英文名稱:PS48
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
PS48是一小分子PDK1激動劑,Kd值為10.3uM,特異性結合PDK1的PIF-binding pocket,區別于ATP結合位點。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1180676-32-7 純度:99.97% 分子量:286.75 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
蟲草屬小鼠β葡萄糖苷Anti-RAPGEF1 Antibody人抗釀酒酵母抗體(ASCA)
鳥芽孢桿菌屬大鼠高遷移率族蛋白B1Anti-RASGRF1 Antibody人抗釀酒酵母抗體(ASCA)
芽胞桿菌ATCC 9372;(曾用名:枯草芽胞桿菌黑色變種)大鼠相關血漿蛋白AAnti-RASGRF1 Antibody人遲現抗原4(VLA4)
多變毛霉人膽囊收縮/腸促胰肽Anti-RASL10A Antibody人遲現抗原4(VLA4)
粉紅擲孢酵母小鼠谷脫羧自身抗體Anti-RAPGEF5 Antibody人吖啶橙(AO)
黑曲霉大鼠內皮脂肪Anti-RASD2 Antibody人吖啶橙(AO)
尖鐮孢菌人Ⅲ型前膠原肽Anti-RASSF4 Antibody人喋呤(MTX)
氣單胞菌小鼠雌二受體Anti-RAX Antibody 人喋呤(MTX)
微紫青霉大鼠碳酐Anti-RASL10B Antibody人對基甲(PABA)
南海桿狀菌人Ⅱ型膠原Anti-RASSF6 Antibody人對基甲(PABA)
嗜熱鏈球菌小鼠半乳糖6硫酯Anti-RBFOX3 Antibody人(LPA)
栓菌屬大鼠降鈣基因相關肽Anti-RBL2 Antibody人(LPA)
Winogradskyella eximia小鼠甲狀旁腺激相關蛋白Anti-RBBP8 Antibody人免疫核糖核(Irna)
植物乳桿菌大鼠胃動Anti-RBM20 Antibody人免疫核糖核(Irna)
枇杷鏈格孢小鼠Anti-RBFOX3 Antibody人β萘(β-Nph)
球孢白僵菌人Ⅰ型前膠原羧基端肽Anti-RBAK Antibody人β萘(β-Nph)
硫氧環蛋白還原1抗體尖孢鐮刀菌黃瓜專化型(斜面)人牙周膜成纖維細胞
絲/蘇激TLK2抗體尖鐮孢菌(斜面)人腎小球系膜細胞
共濟失調毛細血管擴張癥D相關蛋白抗體木蹄層孔菌(斜面)人多發性骨髓瘤細胞
轉化生長因子β調節蛋白4抗體禾谷鐮刀菌(斜面)人霍奇金淋巴瘤細胞
PDK1激動劑(PS48) L-精甲酯
淡紫擬青霉 D-苯甘乙酯鹽酸鹽
黃桿 DL-乙酯鹽酸鹽
綠色木霉 L-半胱乙酯鹽酸鹽
黃曲霉 DL-絲甲酯鹽酸鹽
棲藻海桿狀 DL-甲酯鹽酸鹽
釀酒酵母 L-組甲酯
紫荊假諾氏 L-天冬-β-甲酯鹽酸鹽
佛雷德里克斯堡假單胞 L-天冬二甲酯鹽酸鹽
棕灰口蘑 β-甲酯鹽酸鹽
嗜油假單胞 D-纈甲酯鹽酸鹽
大腸埃希 D-絲甲酯鹽酸鹽
土星擬威爾酵母 D-亮甲酯鹽酸鹽
蘇云金芽孢桿 L-酪甲酯鹽酸鹽
小單孢 D-甲酯鹽酸鹽
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)