詳細介紹
商品介紹:
Tubastatin A鹽酸鹽是HDAC6選擇性抑制劑,IC50為15nM,比對其它亞型的抑制性高1000倍(相對HDAC8是57倍)。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1252003-15-8 純度:99.05% 分子量:335.4 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Tubastatin-A | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
三葉草根瘤菌Alexa Fluor 555標記的小鼠抗羊IgGAnti-SECTM1 Antibody互生蛋白γ2(SNTγ2)
網脈木耳PE-Cy3標記的兔抗豚鼠IgMAnti-SELENBP1 Antibody互生蛋白γ1(SNTγ1)
釀酒酵母膠體金標記的羊抗小鼠IgGAnti-SELL Antibody互生蛋白β2(SNTβ2)
細鏈格孢膠體金標記的羊抗兔IgGAnti-SELL Antibody互生蛋白β1(SNTβ1)
出芽短梗霉(黑酵母)羅丹明標記的羊抗小鼠IgGAnti-SELP Antibody互生蛋白α1(SNTα1)
生芽紅細菌羅丹明標記的羊抗兔IgGAnti-SELP Antibody互聯蛋白神經元中間絲蛋白α(INα)
梨生囊殼孢FITC標記的驢抗羊IgGAnti-SELL Antibody(PB0399)琥珀受體1(SUCNR1)
蘇云金芽孢桿菌庫爾斯塔克亞種FITC標記的小鼠抗羊IgGAnti-SELP Antibody(PB0288)骺蛋白聚糖(EPYC)
乳桿菌屬辣根過氧化物標記的羊抗小鼠IgGAnti-SELPLG Antibody紅藻離子能谷受體2(GRIK2)
豬鏈球菌(不可提供)辣根過氧化物標記的兔抗羊IgGAnti-SELPLG Antibody紅衍生核因子2樣蛋白2(NFE2L2)
乙型副傷寒沙門菌Alexa Fluor 555標記的兔抗羊IgMAnti-SEMA3A Antibody紅膜蛋白7.2b(STOM)
鏈球菌(不定種)PE-Cy5.5標記的兔抗羊IgMAnti-SEMA3A Antibody紅補體受體1(CR1)
清酒假絲酵母PE-Cy7標記的兔抗羊IgMAnti-SEMA3B Antibody亨廷頓關聯蛋白1(HAP1)
釀酒酵母PE-Cy7標記的驢抗豚鼠IgGAnti-SEMA3C Antibody亨廷頓蛋白(HTT)
變灰青霉PE-Cy5.5標記的兔抗豚鼠IgMAnti-Sema6A Antibody黑轉鐵蛋白(MFI2)
泊庫島食烷菌PE-Cy7標記的兔抗豚鼠IgMAnti-SENP6 Antibody黑曲菌(MREG)
軸突生長誘導因子3抗體總狀毛霉(斜面)大鼠肺泡上皮細胞提取物
B淋巴細胞鏈接激活蛋白抗體河流弧菌大鼠關節軟骨細胞提取物
腦啡肽2抗體Lysinibacillusmacroides大鼠滑膜細胞提取物
神經生長調節蛋白1抗體Massiliahaematophila大鼠骨骼肌細胞提取物
HDAC6抑制劑(Tubastatin A鹽酸鹽)杰氏假單胞 聚乙二2000單甲
擬枝孢鐮孢 筋骨草L2
Marisediminicola 筋骨草G1
炭黑曲霉 聚乙二1900單甲
根瘤 筋骨草H1
莫哈韋芽孢桿 聚乙二750單甲
金針12 筋骨草F4
細枝農霉 地芰普內酯
呼倫貝爾無色需堿 聚乙二550單甲
異常漢遜酵母 山橘脂酸
釀酒酵母 3-表去氫土莫酸
嗜鹽芽孢桿 中性氧化鋁
米曲霉 中性氧化鋁
大腸桿 6α-羥基豬苓酸C
漢塔成對桿 堿性氧化鋁