Jumonji組蛋白去甲基酶抑制劑（JIB-04）公司*的產品：Mouse trypsin ELISA Kit 小鼠胰蛋白膽固 98%
ODF(Mouse osteoclast differentiation factor) ELISA Kit 小鼠破骨分化因子膽固 用于培養，99%（GC)
TLR-9/CD289(Mouse Toll-like receptor 9) ELISA ki

產品屬性：

中文名稱：Jumonji組蛋白去甲基酶抑制劑（JIB-04）

英文名稱：JIB-04

產品規格：1mL(10mM)|10mg|50mg

發貨周期：1～3天
公司產品僅用于科研

商品介紹：

細胞生物學研究有以下幾個方面：

細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：

①細胞核、染色體以及基因表達的研究；

②生物膜與細胞器的研究；

③細胞骨架體系的研究；

④細胞增殖及其調控；

⑤細胞分化及其調控；

⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細胞的起源與進化；

⑧細胞工程.

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

哈茨木霉Alexa Fluor 647標記的羊抗雞IgGAnti-RXRA Antibody肌肌激(CKM)

亮白曲霉Alexa Fluor 488標記的羊抗雞IgGAnti-S100A10 Antibody肌紅蛋白(MYO)

伯克霍爾德菌*FITC標記的兔抗雞IgGAnti-S100A11 Antibody肌苷三磷(ITPA)

枯草芽胞桿菌辣根過氧化物標記的兔抗雞IgGAnti-S100A4 Antibody肌鈣腔蛋白(SRL)

松口蘑Alexa Fluor 350標記的兔抗雞IgGAnti-S100A6 Antibody肌鈣蛋白T()

普通變形桿菌*Alexa Fluor 488標記的兔抗雞IgGAnti-S100A6 Antibody肌鈣蛋白I(TNI)

中間氣單胞菌辣根過氧化物標記的驢抗兔IgGAnti-S100A7 Antibody肌動絲蛋白(AF)

地衣芽胞桿菌FITC標記的驢抗兔IgGAnti-S100A6 Antibody肌動蛋白束蛋白3(FSCN3)

巴氏醋桿菌堿性磷（AP）標記的驢抗兔IgGAnti-SACS Antibody肌動蛋白束蛋白2(FSCN2)

冰川薄層菌屬Cy5標記的驢抗兔IgGAnti-S100A9 Antibody肌動蛋白束蛋白(FSCN)

釀酒酵母Alexa Fluor 488標記的驢抗兔IgGAnti-S100A8 Antibody肌動蛋白γ1(ACTγ1)

總狀毛霉Alexa Fluor 555標記的驢抗兔IgGAnti-S100B Antibody肌動蛋白β(ACTβ)

枯草芽孢桿菌Alexa Fluor 647標記的驢抗兔IgGAnti-S100A9 Antibody肌蛋白(MSC)

圍小叢殼菌PE標記的兔抗狗IgGAnti-SAFB Antibody肌加氧(MIOX)

哈茨木霉生物標記的驢抗兔IgGAnti-SAMHD1 Antibody肌單磷3(IMPA3)

扇形側耳生物標記的羊抗兔IgGAnti-SAG Antibody肌單磷2(IMPA2)

間變性淋巴瘤激核相互作用伴侶蛋白抗體甲基營養型芽胞桿菌大鼠小腸平滑肌細胞提取物

核仁蛋白C23抗體疣孢漆斑菌大鼠直腸平滑肌細胞提取物

神經細胞穿透2抗體枯草芽胞桿菌大鼠腸上皮細胞提取物

A型流感核蛋白抗體禾谷鐮孢大鼠支氣管平滑肌細胞提取物
Jumonji組蛋白去甲基酶抑制劑（JIB-04）孟氏假單胞 磷酸三

黃曲霉 3-去氧蘇木查耳酮

解脂假絲酵母 焦棓酚紅

早熟艾美耳球蟲 3-沒食子酰基奎寧酸

大腸埃希氏 帕克

枯草芽孢桿 乳清蛋白

黃傘 三七皂苷T5

黃曲霉 佛波

金龜子綠僵 SA緩沖液

褐發網 Alpha-三烯酚

類干酪乳桿類干酪亞種 松香酸鈉

糙皮側耳 3-氧代坡模酸甲酯

異常畢赤酵母 貝萼皂苷元甲酯

細麗外擔 多索茶堿

白假絲酵母 Gama-三烯酚 

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)