詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
英文名稱:Nortadalafil
產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
發貨周期:1~3天
商品介紹:
Nortadalafil是demethyl Tadalafil,為PDE5抑制劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:171596-36-4 別名:Demethyl Tadalafil 純度:99.60% 分子量:375.38 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
對羥基乙酰(標準品)英文名稱: Dolasetron mesylate 8號染色體開放閱讀框72抗體包裝5g
多尼培南(標準品)英文名稱: Doxepin HCl 7號染色體開放閱讀框30抗體包裝5MG
多潘立(標準品)英文名稱: Doxepin HCl 7號染色體開放閱讀框57抗體包裝1g
多索茶堿(標準品)英文名稱: Duloxetine hcl7號染色體開放閱讀框36抗體包裝1g
多效唑(標準品)英文名稱: Duloxetine hcl7號染色體開放閱讀框42抗體包裝1g
鵝去氧膽(標準品)英文名稱: Dutasteride7號染色體開放閱讀框43抗體包裝5g
厄貝沙坦(標準品)英文名稱: Dutasteride7號染色體開放閱讀框44抗體包裝1g
厄多司坦(標準品)英文名稱: Edaravone8號染色體開放閱讀框40抗體包裝5g
恩諾沙星(標準品)英文名稱: Edaravone8號染色體開放閱讀框37抗體包裝1g
恩曲他濱(標準品)英文名稱: Hydroquinidine8號染色體開放閱讀框45抗體包裝10g
恩替卡韋(標準品)英文名稱: Epinastine HCl8號染色體開放閱讀框80抗體包裝50g
二基-(2-)(標準品)英文名稱: Epinastine HCl9號染色體開放閱讀框3抗體包裝1g
二基-(2-)(克霉唑雜質I,標準品)英文名稱: Eplerenone8號染色體開放閱讀框47抗體包裝250mg
二(標準品)英文名稱: Eplerenone8號染色體開放閱讀框48抗體包裝25ml
二倍他米松(標準品)英文名稱: Etodolac8號染色體開放閱讀框58抗體包裝25g
蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質量規格:>98%胸腺嘧啶核苷磷化試劑盒喜樹堿;Camptothecine
鮮綠青霉Penicillium│viridicatum 質量規格:≥580IU/ mg,BR胸腺基質淋巴生成試劑盒新橙皮苷二氫查爾;Neosperidi
淡紫擬青霉Paecilomyces│lilacinus 質量規格:含量測定胸腺活化調節趨化因子試劑盒西紅花苷II;Crocin II
PDE5抑制劑(Nortadalafil)線粒體相關富含半胱蛋白抗體去氧穿心蓮內酯 DEOXYANDROGRAPHOLIDE(RG)Human, Mouse, Rat
跨膜接頭蛋白SIT抗體去氧穿心蓮內酯 DEOXYANDROGRAPHOLIDE(RG)Human, Mouse
SKAP55蛋白抗體脫水穿心蓮內酯 ANDROGRAPHOLIDE, DEHYDRO(RG)Human, Mouse
沉默調節相關蛋白2抗體脫水穿心蓮內酯 ANDROGRAPHOLIDE, DEHYDRO(RG)Human, Mouse, Rat
腫瘤/抗原11.2抗體穿心蓮內酯 ANDROGRAPHOLIDE(P)Human, Mouse
平滑肌蛋白抗體芹菜 APIGENIN(P) (Compendial Traceable)Human, Mouse
SHROOM1蛋白抗體蒽黃 ANTHRAFLAVIC ACID(RG)Human, Mouse, Rat
磷化沉默調節蛋白1抗體蒽黃 ANTHRAFLAVIC ACID(RG)Human, Mouse, Rat
SCK蛋白抗體丁香酚 ANTHRANILIC ACID METHYLESTER(SG)Human