詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Varespladib | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
LY315920(Varespladib)是高活性的人非胰腺分泌磷脂酶A2(sPLA)選擇性抑制劑,IC50為7nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:172732-68-2 別名:LY315920 純度:98.75% 分子量:380.39 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
鹽帕他莫英文名稱: Potassium hydrogen tartrate磷酯Cβ2抗體包裝1g
鹽維林英文名稱: Potassium O-ethyl xanthate硫氧還蛋白過氧化物Ⅱ/巰基抗氧化蛋白抗體包裝250mg
鹽英文名稱: Potassium oleate磷脂酰肌激(PI3Kβ)抗體包裝5g
鹽達泊(混旋)英文名稱: Potassium phosphate, dibasic, trihydrate磷脂磷2結構域3抗體包裝100g
鹽達泊(右旋)英文名稱: Potassium phosphate, tribasic trihydrate胞質分裂調控蛋白1抗體包裝500g
鹽氮卓斯汀英文名稱: Potassium silicate hydrate磷化蛋白磷2A(PP2Aα)抗體包裝5mg
鹽地芬尼多英文名稱: Potassium stearate石骨癥相關蛋白PLEKHM1抗體包裝1g
鹽丁英文名稱: Potassium tartrate, hydrate血小板白C激底物同源結構域M2抗體包裝25g
鹽度洛英文名稱: Potassium lurite血小板白C激底物同源結構域M3抗體包裝5g
鹽英文名稱: Potassium tetraoxalate dehydrate多腺苷二磷多聚抗體(N端)包裝1g
鹽多沙普侖英文名稱: Potassium thiosulfate酪磷PTPδ抗體 蛋白酪磷D受體抗體包裝5g
鹽伐昔洛韋/鹽萬乃洛韋英文名稱: Potassium titanyl oxalate ,dehydrate鈣粘蛋白相關神經受體8抗體包裝1g
鹽非那吡啶;3-基偶氮-2,6-二基吡啶鹽鹽英文名稱: p-Phthaldehyde原鈣粘附蛋白18抗體包裝5g
鹽非索非那定英文名稱: Propyl red原鈣粘附蛋白20抗體包裝1g
鹽芬戈莫德英文名稱: Pyrazole原鈣粘附蛋白8抗體包裝25g
絲蓋口蘑Tricholoma│inocybeoides A. Pearson 質量規格:HPLC>98%,標準品過氧化物體增殖激活物受體γ輔激活因子1α試劑盒諾沙星;純品型;標準品;有證書
青霉菌屬菌種Penicillium│sp. 質量規格:>98.5%,BR,可用于培養過氧化氫試劑盒氧沙星;純品型;標準品;有證書
小葉三點金根瘤菌Rhizobium│sp. 質量規格:HPLC≥98%,標準品果糖二磷縮A試劑盒磺噠;純品型;標準品;有證書
sPLA抑制劑(Varespladib)轉錄因子蛋白SIM1抗體吉拉爾特試劑T Girard's Reagent T >98.0%(T)Human, Mouse, Rat
核轉錄因子SOX14抗體無水甜菜 Betaine Anhydrous>97.0%(T)Human, Mouse
信號轉導與轉錄激活因子1抗體無水甜菜 Betaine Anhydrous>97.0%(T)Human, Mouse, Rat
核轉錄因子SOX6抗體鈹試劑 III Beryllon IIIHuman, Mouse, Rat
核轉錄因子SOX8抗體鈹試劑 III Beryllon IIIHuman, Mouse, Rat
STAC1蛋白抗體鈹試劑 II Beryllon IIHuman, Mouse
亞砷鹽相關蛋白抗體鈹試劑 II Beryllon IIHuman
雙鏈RNA結合蛋白Staufen2抗體硫黃連水合物 Berberine Sulfate Hydrate>98.0%(LC&T)Human
溶質載體家族蛋白22成員5抗體硫黃連水合物 Berberine Sulfate Hydrate>98.0%(LC&T)Human, Mouse, Rat