詳細介紹
產品屬性:
中文名稱:嘧啶合成抑制劑(Leflunomide)
英文名稱:Leflunomide
產品規格:1mL(10mM)|50mg|100mg|500mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
Leflunomide是一種嘧啶合成抑制劑,通過抑制二氫乳清酸脫氫酶(dihydroorotate dehydrogenase)起作用,具有抗風濕的作用。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:75706-12-6 別名:HWA486;RS-34821;SU101 純度:98.89% 分子量:270.21 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
乳乳球菌RAS癌基因相關蛋白Rab6C抗體Anti-CXCL3 Antibody脂質轉運蛋白(CETP)
香魚假單胞菌RAP1GAP激活蛋白抗體Anti-CXCL2 Antibody脂質運載蛋白9(LCN9)
博伊丁酵母原癌基因酪蛋白激受體RET/多發性內分泌腺瘤和甲狀腺髓樣癌蛋白抗體Anti-CXCL16 Antibody脂質運載蛋白8(LCN8)
拉曼被孢霉磷化原癌基因酪蛋白激受體RET抗體Anti-CXCL5 Antibody脂質運載蛋白6(LCN6)
馬克斯克魯維酵母馬克斯變種G蛋白家族RAB21蛋白抗體Anti-CXCL9 Antibody脂質運載蛋白15(LCN15)
貝氏不動桿菌泛結合蛋白P62抗體Anti-CXCL8 Antibody脂質運載蛋白12(LCN12)
蛹蟲草Rap2A抗體Anti-CXCL8 Antibody脂質運載蛋白10(LCN10)
粉狀畢赤酵母胰島β生長因子Reg IIIγ抗體Anti-CXCR1 Antibody脂質運載蛋白1(LCN1)
爪哇根霉胰島β生長因子Reg IIIα 抗體Anti-CXCL9 Antibody脂3(LPIN3)
假單胞菌核糖體蛋白S6修飾樣蛋白A抗體Anti-CXCR2 Antibody脂2(LPIN2)
變幻青霉RFTN2蛋白抗體Anti-CXCR2 Antibody脂1(LPIN1)
蒙古鹽單胞菌環指蛋白213Anti-CXCR2 Antibody脂生蛋白(ADIG)
室內外電子溫濕度計受體結合絲蘇激3抗體Anti-CXCR1 Antibody脂解激活脂蛋白受體(LSR)
堅強芽孢桿菌受體結合絲蘇激5抗體Anti-CXCR3 Antibody(PB0038)脂肪型脂肪結合蛋白(FABP4)
黃孢原毛平革菌RNA結合蛋白15抗體Anti-CXCR4 Antibody脂肪膜關聯蛋白(APMAP)
綠色木霉環指蛋白47抗體Anti-CXCR4 Antibody脂肪轉移2(LIPT2)
半裸鐮孢Fusarium│semitectum 質量規格:>98%,BR
日本蟲草廣東變型Cordyceps│japonica f. guangdongensis 質量規格:>97%,BR
雞腿菇(毛頭鬼傘)Coprinus│comatus 質量規格:>98%,BR
嘧啶合成抑制劑(Leflunomide)鹽反硝化枝芽孢桿 MiddleBrook7H10瓊脂硫酸肝糖蛋白Elisa
匍匐曲霉原變種 MiddleBrook7H11瓊脂硫酸類肝Elisa
大豆慢生根瘤 曲霉瓊脂基礎(AFPA)硫酸軟骨Elisa
青色鏈霉 假單胞分離瓊脂卵磷脂Elisa
淡紫灰吸水鏈霉 knudson糜蛋白Elisa
釀酒酵母 TGE培養基球蛋白AElisa
MMO-MUG培養基球蛋白EElisa
葡萄牙棒孢酵母 硫細培養基球蛋白GElisa
假單胞屬 GVPC瓊脂基礎球蛋白G1Elisa
栗酒裂殖酵母 霉培養基球蛋白G2Elisa
藤黃微球 ASS瓊脂球蛋白G2aElisa
乳酸片球 AC肉湯球蛋白G2bElisa
阿納托利亞正青霉 細L型增液球蛋白G3Elisa
核盤 細L型分離瓊脂球蛋白G4Elisa
平菇 溶血瓊脂基礎球蛋白MElisa
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)