詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
PNU-159682 | 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
PNU-159682是Nemorubicin的有效代謝物,具有很強的細胞毒性,為有效的拓撲異構酶抑制劑,和ADCs cytotoxin。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:202350-68-3 純度:95.19% 分子量:641.62 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
中國考克娃酵母四分子交聯體4抗體(四旋蛋白)Anti-HYI Antibody突觸囊泡蛋白樣蛋白2(SYTL2)
黃曲霉轉錄因子Tbx18抗體Anti-IBSP Antibody突觸囊泡蛋白Ⅻ(SYT12)
芽胞桿菌干燥綜合征相關蛋白2抗體Anti-ICAM1 Antibody突觸囊泡蛋白Ⅺ(SYT11)
天白鏈霉菌甲狀腺激受體相互作用蛋白4抗體Anti-ICAM1 Antibody突觸囊泡蛋白ⅩⅦ(SYT17)
多根硬皮馬勃β-taxilin蛋白抗體Anti-ICAM1 Antibody(PB0053)突觸囊泡蛋白ⅩⅥ(SYT16)
樟疫霉轉錄因子E2F二聚體蛋白2抗體Anti-ICA1 Antibody突觸囊泡蛋白ⅩⅤ(SYT15)
產黃青霉TIP30蛋白抗體Anti-ICAM1 Antibody(PB0054)突觸囊泡蛋白ⅩⅣ(SYT14)
不動桿菌酪蛋白硫轉移1抗體Anti-ICOS Antibody突觸囊泡蛋白ⅩⅢ(SYT13)
黑曲霉Toll樣受體5抗體Anti-ICAM2 Antibody突觸囊泡蛋白Ⅹ(SYT10)
懶惰甲基桿菌跨膜和泛樣結構域蛋白1抗體Anti-ICOS Antibody突觸囊泡蛋白Ⅸ(SYT9)
舒氏氣單胞菌磷化翻譯控制腫瘤蛋白抗體Anti-ICOS Antibody突觸囊泡蛋白Ⅷ(SYT8)
紫紅曲霉磷化調節染色體組裝激1抗體Anti-ICOS Antibody突觸囊泡蛋白Ⅶ(SYT7)
Bacillus subtilis subsp. inaquosorum 腫瘤抑抗體Anti-ID2 Antibody突觸囊泡蛋白Ⅵ(SYT6)
草木樨中華根瘤菌轉錄因子Tbx3抗體Anti-IDE Antibody突觸囊泡蛋白Ⅴ(SYT5)
德氏乳桿菌保加利亞亞種磷化酪羥化抗體Anti-IDE Antibody突觸囊泡蛋白Ⅳ(SYT4)
黃網鏈霉菌轉錄因子3抗體(螺旋環螺旋蛋白HE47)Anti-IDE Antibody突觸囊泡蛋白Ⅲ(SYT3)
5-羥色胺受體1E抗體多粘芽孢桿菌小鼠肺大動脈內皮細胞
5-羥色胺受體1F抗體醋桿菌屬小鼠肺動脈成纖維細胞
5-羥色胺受體2A抗體羊肚菌屬(斜面)小鼠氣管和支氣管上皮細胞
5-羥色胺受體2B抗體水井坊梭菌小鼠肺大靜脈內皮細胞
拓撲異構酶抑制劑(PNU-159682)尖頂羊肚 4-苯甲酰角質Elisa
大腸埃希氏 銅、鐵、鎳、釩/Cu, Fe, Ni, V骨堿性磷酸Elisa
微小鏈霉 銅、鐵、鎳、釩/Cu, Fe, Ni, VCD14分子Elisa
滋養節桿 4-溴苯酸輪狀病IgG抗體Elisa
生暗灰鏈霉 銅、鐵、鎳、鋅/Cr, Cu, Ni, Zn核糖基轉移1Elisa
直喙鐮刀 羧甲基-β-環糊精核糖磷酸焦磷酸激1Elisa
密蘇里游動放線 鎘、銅、鉛、鋅/Cd, Cu, Pb, Zn脫氫Elisa
耐鹽芽孢桿 鈣、鍶、鋇、鋰/Ca, Sr, Ba, Li絲氨酸蛋白Elisa
解淀粉芽孢桿 2,6-二吡啶-4-甲酸內皮Elisa
蘇云金芽胞桿庫爾斯塔克亞種 枯名Tau蛋白Elisa
金龜子綠僵 鎘、銅、鎳、鋅/Cd, Cu, Pb, Zn磷酸化Tau蛋白Elisa
產凍膠 塞來西布Aβ42Elisa
白色雞腿菇 鈣,,鎂,鈉/Ca, K, Mg, Na(鹽酸介質)偽狂犬分泌型sIgA抗體Elisa
腸膜明串珠右旋葡聚糖亞種 3,4-二羥基半胱氨酸蛋白3Elisa
藤黃八疊球 S-8大孔吸附樹脂乳清酸蛋白Elisa