詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
FR 180204 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
FR180204是一種選擇性的,ERK的ATP競爭性抑制劑,對ERK1和ERK2的Ki值分別為0.31μM和0.14μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:865362-74-9 純度:99.60% 分子量:327.34 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
蘋果鏈格孢急性髓白血病1蛋白抗體Anti-CX3CL1 Antibody中心體蛋白2(CETN2)
Pseudomonas coleopterorum指狀蛋白RET抗體Anti-CXCL1 Antibody中心體蛋白1(CETN1)
蘇云金芽胞桿菌印第安那亞種環指蛋白39抗體Anti-CX3CL1 Antibody中心體BRCA2相互作用蛋白(CNTROB)
中國臺灣根霉RAS癌基因家族蛋白RAB40B抗體Anti-CUL5 Antibody中心粒外周物質1(PCM1)
葡萄座腔菌磷化Raf激抑制蛋白抗體Anti-CXADR Antibody中心粒旁(PCNT)
干草鞘單胞菌肌相關蛋白1抗體Anti-CXCL1 Antibody中腦星形膠質來源神經營養因子(MANF)
Marinobacter excellensRAS癌基因家族蛋白RAB40A抗體Anti-CXCL10 Antibody中腦核仁蛋白(MIDN)
陰溝腸桿菌溶解亞種RAS癌基因家族蛋白RAB40C抗體Anti-CXCL10 Antibody中間絲蛋白(SYNC)
淡紫擬青霉松弛3抗體Anti-CXCL12 Antibody中間密度脂蛋白(IDL)
葉片微桿菌類風濕因子抗體Anti-CXCL10 Antibody中間α-球蛋白抑制因子H5(ITIH5)
黑靈芝視網膜色上皮特異性蛋白65抗體Anti-CXCL12 Antibody中間α-球蛋白抑制因子H4(ITIH4)
釀酒酵母RhoB蛋白抗體Anti-CXCL12 Antibody中間α-球蛋白抑制因子H3(ITIH3)
穿孔艾美耳球蟲G蛋白偶聯受體135/松弛受體3抗體Anti-CXCL16 Antibody中間α-球蛋白抑制因子H2(ITIH2)
葡萄座腔菌絲蛋白激1抗體Anti-CXCL13 Antibody中間α-球蛋白抑制因子H1(ITIH1)
陰溝腸桿菌環指蛋白41抗體Anti-CXCL13 Antibody(PB0726)質膜膜泡關聯蛋白(PLVAP)
島生異擔子菌核基質蛋白21抗體Anti-CXCL2 Antibody酯D(ESD)
米曲霉Aspergillus│oryzae 質量規格:>99%,BR
大腸埃希菌Escherichia│coli 質量規格:>98%,BR
40183=ATCC23968=CBS951.68=IFO12920=INA資源名稱: 淺紫鏈霉菌 質量規格:0.98
ERK抑制劑(FR180204)淡紫擬青霉 MIO培養基降鈣Elisa
巴西果小克銀漢霉 -7-羧酸結合珠蛋白Elisa
暗孢小克銀漢霉 D/E中和肉湯金屬硫蛋白Elisa
痤瘡酸桿 D/E中和瓊脂精氨酸Elisa
孟氏假單胞 BCYE瓊脂基礎抗肌動蛋白抗體Elisa
釀酒酵母 氧化三培養基可溶性間粘附分子1Elisa
檬果炭疽病 CVT瓊脂可溶性血管內皮蛋白C受體Elisa
淺黃隱球酵母 Iron瓊脂藍耳病抗體Elisa
結腸彎曲 STAA培養基酪氨酸激AElisa
奈良鏈霉 發光培養基酪氨酸激BElisa
大腸埃希氏桿 產組培養基酪氨酸激CElisa
柱孢綠僵 (腦)心浸液瓊脂酪酪肽Elisa
西方伊薩酵母 大腸群快檢紙片(水源水)粒巨噬集落激因子Elisa
金黃殼囊孢 大腸群快檢紙片(食品)磷酸化酪氨酸激2Elisa
紅曲紅曲 TCH(噻吩-2-羧酸酰肼)流行性腹瀉病抗體Elisa