詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Pirfenidone | 1mL(10mM)|100mg|500mg|1g|5g | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
Pirfenidone降低TGF-β2mRNA水平和TGF-β2蛋白成熟,因為降低表達和直接抑制TGF-β前體蛋白轉化酶Furin。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:53179-13-8 別名:AMR69 純度:99.98% 分子量:185.22 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
石椒草(標準品)英文名稱: Ecdysterone金屬硫蛋白抗體包裝1g
石榴皮(標準品)英文名稱: Dehydroandrographolide磷化微管相關蛋白2抗體包裝250mg
石榴皮鞣;安石榴林(標準品)英文名稱: Dehydroandrographolide succinate內皮MMRN1蛋白抗體包裝1g
石榴子(標準品)英文名稱: Anhydroicaritin磷化絲裂原活化蛋白激激1/2抗體包裝5g
石杉堿(標準品)英文名稱: 1-Deoxynojirimycin磷化肝生長因子受體(原癌基因)抗體包裝25g
矢車菊-3-O-葡萄糖苷(標準品)英文名稱: 10-Deacetylbaccatin III磷化肝生長因子受體(原癌基因)抗體包裝5g
使君子(使君子仁)(標準品)英文名稱: 10-Deacetylbaccatin III磷化髓樣白血病-1抗體包裝25g
首烏藤(標準品)英文名稱: vitamin B1磷化雙微體2癌基因抗體包裝5g
熟地黃(標準品)英文名稱: Vitamin B1磷化肌增強因子2抗體包裝1g
鼠尾草酚(標準品)英文名稱: vitamin B12磷化肌增強因子2抗體包裝1g
鼠尾草(標準品)英文名稱: vitamin B2磷化絲裂原活化蛋白激激1抗體包裝250mg
薯莨(標準品)英文名稱: vitamin B2磷化微管相關蛋白2抗體包裝1g
薯蕷皂苷;重樓皂苷III(標準品)英文名稱: vitamin D2絲裂原活化蛋白激活化的蛋白激2抗體包裝25g
薯蕷皂;薯蕷皂苷元(標準品)英文名稱: Sulfisoxazole磷化絲裂原活化蛋白激活化的蛋白激2抗體包裝5g
雙氫(標準品)英文名稱: Carboxyatractyloside磷化絲裂原活化蛋白激活化的蛋白激2抗體包裝1g
黑曲霉Aspergillus│niger 質量規格:>98.5%抗G2s抗體試劑盒大薊苷;pectolinarin
腐皮鐮孢菌Haematonectria│haematococca (Berk. & Broome) Samuels & Rossman 質量規格:HPLC>98.0%,標準品抗EB病抗體試劑盒橙皮油內酯;Auraptene
黑曲霉Aspergillus│niger 質量規格:BR,98%抗E3泛蛋白連接TRIM21試劑盒柴胡皂苷B1;Saikosaponin
TGF-β前體蛋白抑制劑(Pirfenidone)致癌因C-Myc抗體鹽決奈達 Lincomycin HCl
膽囊收縮8抗體鹽喹那普利 Lincomycin HCl
上皮鈣粘附分子抗體鹽拉貝洛爾 Liothyronine sodium
結合轉化激活因子CITED1抗體鹽洛美利 Lomefloxacin HCl
Ⅱ型膠原α1蛋白/軟骨鈣抗體鹽馬尼地平 Lomefloxacin HCl
CSMD2蛋白抗體鹽美西律(慢心率) Loteprednol Etabonate
CSMD3蛋白抗體鹽尼非卡蘭 Loteprednol Etabonate
鈣調神經磷CSTP1抗體鹽尼卡地平 Lovastatin,Monacolin K
CTAGE6蛋白抗體鹽普拉格雷 Lovastatin,Monacolin K