詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Poziotinib | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
Poziotinib(NOV120101;HM781-36B)是泛HER激酶不可逆抑制劑,對HER1/HER2/HER4的IC50值分別為3/5/23nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1092364-38-9 別名:HM781-36B;NOV120101 純度:99.66% 分子量:491.34 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
屎腸球菌沉默調節蛋白1抗原Anti-ECRG4 Antibody人前心鈉肽(Pro-ANP)
金針菇S相激相關蛋白抗原Anti-EDNRA Antibody人前心鈉肽(Pro-ANP)
干酪乳桿菌碳氫鈉協同轉運蛋白4-A4Anti-ECRG4 Antibody人角蛋白13(CK-13)
枯斑擬盤多毛孢碳氫鈉協同轉運蛋白4-A7抗原Anti-EDNRA Antibody人角蛋白13(CK-13)
Lactococcus sp.線粒體促凋亡蛋白抗原Anti-EDNRA Antibody人角蛋白17(CK17)
匍匐曲霉乙酰轉運蛋白1抗原Anti-EEF1A1 Antibody人角蛋白17(CK17)
草青霉磷鈉協同轉運蛋白抗原Anti-EEF1B2 Antibody人制瘤M受體(OSMR)
Pseudarthrobacter運動神經元生存蛋白1抗原Anti-EEF1G Antibody人制瘤M受體(OSMR)
糞纖維單胞菌磷化Smad2抗原Anti-EEF1B2 Antibody人B淋巴瘤因子3(Bcl3)
污黑腐皮殼Smad4抗原Anti-EEF2K Antibody人B淋巴瘤因子3(Bcl3)
平菇新宇711Smad 7(多肽)Anti-EFEMP1 Antibody人癌蛋白誘導轉錄物3(OIT3)
少根根霉磷化SMAD(p-Ser425)抗原Anti-EEF2K Antibody人癌蛋白誘導轉錄物3(OIT3)
米曲霉突觸相關膜蛋白25抗原Anti-EFEMP2 Antibody人P27蛋白(P27)
褐色諾氏菌Snail蛋白抗原Anti-EFNA2 Antibody人P27蛋白(P27)
北方蜜環菌因子信號傳導抑制蛋白3抗原Anti-EFNA3 Antibody人P糖蛋白/滲透性糖蛋白(P-gp)
枝孢屬超氧化物歧化1抗原Anti-EFNB1 Antibody人P糖蛋白/滲透性糖蛋白(P-gp)
前列腺癌相關蛋白4抗體泛養副球菌人膽管上皮癌細胞
線粒體導肽水解β抗體金黃色葡萄球菌金黃亞種人胃腸道間質瘤細胞
富含脯蛋白15抗體日勾維腸桿菌人慢性髓系白血病細胞
香葉烯基轉移1β抗體解肝磷脂土地桿菌人永生化肝細胞
泛HER激酶不可逆抑制劑(Poziotinib)黑曲霉 靈芝馬酮
Methylobacterium tarhaniae 毛喉帖 J
短波單胞屬 毛喉帖 G
Bacillus anthracis Cohn 樹皮含滇杠柳A
阪崎腸桿 Ficaprenol 11
白色擬諾氏 Evofolin C
粟酒裂殖酵母 丁香 蕓香糖苷
科氏游動球 Ethyllucidone
大腸桿 erythro-Guaiacylglycerol
糙梗青霉 Erythrodiol 3-palmitate
苯紫鏈霉 桐特靈堿
豆渣雅致放射毛霉 Epoxyparvinolide
季也蒙假絲酵母 表斷馬錢子甙半縮內酯
屎腸球 ent-6,11-Dihydroxy-15-oxokaur-16
白靈菇 等效-16beta,17-二羥基-19-異貝殼杉烷酸