詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
CDK9-IN-1 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
CDK9-IN-1是一種新穎的,有效的CDK9抑制劑,對CDK9/CycT1的IC50值為39nM,用于治療病毒感染。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1415559-43-1 純度:97.95% 分子量:499.54 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
伊貝母(新疆貝母)(標準品)英文名稱: D-Methionine人乙型肝炎核心抗原單克抗體包裝25g
乙酰丁香酚英文名稱: Sofosbuvir (GS-7977)磷化熱休克蛋白27抗體包裝5g
乙酰杠柳寡糖C英文名稱: D-Ornithine monohydrochloride聚組抗體g標簽抗體(C端)包裝25g
乙酰哈巴苷(標準品)英文名稱: H-D-Phe-OtBu.HCI磷化組蛋白H1,4樣蛋白抗體包裝5g
乙?;邹继J(標準品)英文名稱: D-ProlineHER2受體抗體包裝1g
乙酰黃芪皂苷I英文名稱: Cefathiamidine環化核苷調控陽離子通道蛋白亞型4包裝25g
乙酰升麻-3-O-α-L-阿拉伯糖苷英文名稱: H-D-Ser-OHHEAT重復內含蛋白8蛋白抗體包裝5g
乙酰紫草英文名稱: D-Serine methyl ester hydrochloride 雄激調節樣蛋白抗體包裝1g
乙酰紫堇靈(標準品)英文名稱: H-D-Thr-OH雄激調節蛋白2抗體包裝5g
異阿魏(標準品)英文名稱: D-Tryptophan methyl ester hydrochloride角化蛋白S100A18抗體包裝250mg
異貝殼杉烯英文名稱: N-Acetyl-D-tryptophan 型肝炎病NS4B抗體包裝25g
異補骨脂查爾;補骨脂乙(標準品)英文名稱: H-D-Tyr-OMe·HCl異質性核糖核蛋白C1/C2抗體包裝5g
異補骨脂二氫黃(標準品)英文名稱: 2'-O-Methyladenosine異質性核糖核蛋白R包裝5g
異補骨脂色烯查耳英文名稱: D-Valine同源相互作用蛋白激4抗體包裝1g
異補骨脂(標準品)英文名稱: 2'-Deoxy-3'-guanylic acid disodium salt肝輔助因子II抗體包裝5g
保加利亞乳桿菌Lactobacillus│bulgaricus 質量規格:>98%,BR硫氧還蛋白還原試劑盒杠柳苷;Periplocin
紅色擲孢酵母Sporobolomyces│roseus 質量規格:HPLC>98%,標準品硫氧還蛋白,線粒體試劑盒款冬;Tussilagone
產黃青霉Penicillium│chrysogenum 質量規格:>99%,S構型硫氧化還原蛋白試劑盒科羅索;Corosolic acid
CDK9抑制劑(CDK9-IN-1)異質核糖核蛋白hnRNPA2抗體葶藶子(播娘蒿)(標準品) Tazobactam Acid
異質核糖核蛋白U抗體葶藶子(獨行菜)(標準品) Tazobactam Acid
人類狀瘤病16/18 E6抗體通關藤(標準品) β-Nicotinamide adenine dinucleotide hydrate(β-NAD)
HA tag標簽抗體通關藤苷G(標準品) β-Nicotinamide adenine dinucleotide
荷爾蒙敏感脂肪抗體通關藤苷H(標準品) β-NADP
血紅蛋白α1/α-Globin抗體通關藤苷I(標準品) Guanine HCl
Fas相互作用蛋白激2抗體麝香(標準品) Guanine Sulfate
Fas相互作用蛋白激3抗體頭花蓼(標準品) Adenine hydrochloride
人類皰疹病8抗體透骨香(標準品) Inosine