詳細介紹
產品屬性:
英文名稱:CHIR-090
產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
CHIR-090是一種大腸桿菌LpxC抑制劑,Ki為4nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:728865-23-4 純度:98.67% 分子量:437.49 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
九里香(千里香)(標準品)英文名稱: Benzo[ghi]perylene生長因子受體結合蛋白2抗體包裝25g
九香蟲(標準品)英文名稱: 1-OctadeceneGATA結合蛋白3抗體包裝5g
韭菜子(標準品)英文名稱: n-Octylamine粒-巨噬集落激因子受體α抗體包裝5g
長春瑞濱(標準品)英文名稱: Octadecane骨形態形成蛋白拮抗蛋白抗體包裝100g
長春質堿(標準品)英文名稱: 2-Octanone蛋白激GCN2蛋白抗體包裝1g
救必應(標準品)英文名稱: Phenoxyacetic acidG蛋白偶聯受體GPR78蛋白抗體包裝25g
桔梗(標準品)英文名稱: PhenanthreneG蛋白激活內流通道蛋白2抗體包裝5g
桔梗皂苷D(標準品)英文名稱: Pyrene生長因子受體結合蛋白10抗體包裝1g
桔梗皂苷D3英文名稱: (?)-Scopolamine hydrochloride磷化生長因子受體結合蛋白10抗體包裝25g
桔梗皂苷E英文名稱: Tetradecane磷化糖原合激3β抗體包裝5g
桔梗皂苷G1英文名稱: 1,2,3,4-Tetrahydronaphthalene磷化蛋白激GCN2蛋白抗體包裝1g
桔梗皂苷元英文名稱: Trimethyl phosphate磷化蛋白激GCN2蛋白抗體包裝25g
桔梗皂苷元-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷英文名稱: Tri(2-ethylhexyl)phosphate磷化接頭蛋白Gab 1抗體包裝5g
桔紅;桔皮(標準品)英文名稱: Tridecane磷化接頭蛋白Gab 1抗體包裝1g
菊花(標準品)英文名稱: Tetracosane磷化葡萄糖合成1抗體包裝5g
繩狀青霉Penicillium│funiculosum Thom 質量規格:>98%,USP31趨化因子試劑盒尿囊;Allantoin
酵母菌Saccharomyces│sp. 質量規格:HPLC>98%,標準品驅動蛋白家族成員27試劑盒牛磺熊去氧膽;Tauroursodeo
蘋果黑腐皮殼菌Valsa│mali Miyabe & G. Yamada 質量規格:>90%,BR清道夫受體類B成員1試劑盒牛蒡子苷元;Arctigenin
大腸桿菌LpxC抑制劑(CHIR-090)鹽二乙烷
鹽二乙烷
氧雜環戊烷
乙氮雜環己烷
乙環己烷
乙二硅烷
乙異丁烷
乙炔三硅烷
乙烯三硅烷
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)