詳細介紹
商品介紹:
PD169316是一種高效,細胞透過的,有選擇性的p38MAP kinase抑制劑,IC50值為89nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:152121-53-4 純度:97.69% 分子量:360.34 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
產品屬性:
英文名稱:PD 169316
產品規格:1mL(10mM)|10mg|50mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
巨型艾美耳球蟲磷化Src原癌基因抗體Anti-FSCN1 Antibody信號淋巴激活分子家族成員7(SLAMF7)
高地芽孢桿菌STAC2蛋白抗體Anti-FSHB Antibody(PB0138)信號傳導轉錄激活因子6(STAT6)
土曲霉轉錄因子SOX30抗體Anti-FSHR Antibody信號傳導轉錄激活因子5B(STAT5B)
產堿假單胞菌13號染色體開放閱讀框32抗體Anti-FST Antibody信號傳導轉錄激活因子5A(STAT5A)
布雷正青霉線粒體相關富含半胱蛋白抗體Anti-FSHR Antibody信號傳導轉錄激活因子4(STAT4)
美澳型核果褐腐病菌跨膜接頭蛋白SIT抗體Anti-FURIN Antibody信號傳導轉錄激活因子3(STAT3)
黏結珊瑚狀放線菌SKAP55蛋白抗體Anti-FSTL3 Antibody信號傳導轉錄激活因子2(STAT2)
栗疫菌沉默調節相關蛋白2抗體Anti-FUS Antibody信號傳導轉錄激活因子1(STAT1)
木耳腫瘤/抗原11.2抗體Anti-FUT4 Antibody鋅指同源框蛋白4(ZFHX4)
巨大芽孢桿菌平滑肌蛋白抗體Anti-FUT1 Antibody鋅結合α2-糖蛋白1(αZGP1)
香菇SHROOM1蛋白抗體Anti-FUT3 Antibody心臟肌球蛋白結合蛋白C(MYBPC3)
土生叢毛單胞菌磷化沉默調節蛋白1抗體Anti-FXYD1 Antibody(PB0740)心營養樣因子1(CLCF1)
枯草芽孢桿菌SCK蛋白抗體Anti-FZD1 Antibody心型脂肪結合蛋白(FABP3)
米根霉磷鈉協同轉運蛋白抗體Anti-FZD3 Antibody心磷脂酰基轉移1(LCLAT1)
異酒香酵母精結合蛋白2抗體Anti-FZD4 Antibody心磷脂合(CLS)
蠟狀芽孢桿菌唾液結合性免疫球蛋白樣凝集1抗體Anti-G6PD Antibody心肌營養1(CT1)
Sestrin3抗體費氏桿菌謝氏亞種HK-2人腎皮質曲小管上皮細胞
癲癇樣相關蛋白6抗體大腸埃希氏桿菌原代細胞
組蛋白連接作用蛋白抗體螢光假單胞菌人成骨細胞
線粒體乙酰化3抗體潮濕纖維單孢菌人關節軟骨細胞
p38MAP激酶抑制劑(PD 169316)Pectobacterium cypripedii 3,9-二(1, 1-二甲基-2-羥基乙基)-2,4,8,10-氧代螺旋[5.5]十一烷O型口蹄疫合成肽結構蛋白抗體Elisa
孟氏假單胞 4-吡啶甲酰白介3Elisa
哈茨木霉 3-甲基吡唑旋毛蟲抗體Elisa
畢赤酵母 2-吡啶甲酰肼磷脂A2Elisa
產氨短桿 2-氨基咪唑硫酸鹽肺炎支原體Elisa
不動桿 2-吡催產Elisa
雀斑蘑菇 乙酰脲骨骼肌肌球蛋白重鏈4Elisa
分枝節桿 L-甲硫氨酰甘氨酸傳染性胸膜肺炎抗體Elisa
ppic9 磺吡啶胰高血糖樣肽2Elisa
少根根霉 磺醋酰球蛋白DElisa
加利福尼亞鏈霉 4-甲氧基三苯甲基肺炎支原體抗體Elisa
矮小傘枝霉 帕潘立酮α2巨球蛋白Elisa
菠蘿泛 鄰苯二甲酰肼藍耳病抗原Elisa
凍土毛霉 3--4-氟苯酸O型口蹄疫抗原Elisa
林生毛霉 (1R,2R)-(-)-N-(對磺酰基)-1,2-二苯基乙二小反芻獸疫抗原Elisa