商品介紹:
OF-1是BRPF1B和BRPF2bromodomain抑制劑,Kd值分別為100nM和500nM,對BRD4結(jié)合能力弱39倍。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:919973-83-4 純度:98.13% 分子量:440.31 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:BRPF1B和BRPF2bromodomain抑制劑(OF-1)
英文名稱:OF-1
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
巨大芽孢桿菌人2,3Dinor血栓烷B2Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠白三烯C4(LTC4)
球孢白僵菌人11去氫血栓烷B2Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠色C(Cyt-C)
小煤炱菌屬人血栓調(diào)節(jié)蛋白Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠色C(Cyt-C)
核果叢梗孢人纖溶抑制因子/凝血激活的纖溶抑制物Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠游離甲狀腺(FT4)
雙環(huán)林地蘑菇人血小板膜糖蛋白ⅡbⅢaBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠游離甲狀腺(FT4)
海洋布倫茨氏菌人血小板反應(yīng)蛋白/凝血敏感蛋白1Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠血管緊張Ⅰ(Ang-Ⅰ)
雅致放射毛霉人血漿α顆粒膜蛋白Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠血管緊張Ⅰ(Ang-Ⅰ)
松口蘑人末端補體復(fù)合物C5b-9Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠黑色抗體(MC Ab)
水棲黃桿菌人補體蛋白4Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠黑色抗體(MC Ab)
解污泥黃桿菌人補體蛋白3Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠甲狀腺(T4)
地衣芽孢桿菌人ⅡBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠甲狀腺(T4)
長枝木霉人類白抗原B27Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠二肽基肽Ⅳ(DPPⅣ)
土曲霉人結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠二肽基肽Ⅳ(DPPⅣ)
假單胞菌人血清總補體Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠過敏/補體片斷4a(C4a)
加福尼亞犁頭霉人過敏/補體片斷4Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠過敏/補體片斷4a(C4a)
甲基營養(yǎng)型芽胞桿菌人補體片斷5aBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠狀腺原(T3)
鋅指蛋白ZIC5抗體假單胞菌屬歐洲鰻鱺肝臟細胞
鋅指蛋白312抗體黃桿菌屬小鼠脾臟成纖維樣細胞
鋅指蛋白57抗體吡咯伯克霍爾德氏菌幼兔肺成纖維樣細胞
鋅指蛋白300抗體假真菌樣芽孢桿菌人皮膚毛細血管內(nèi)皮細胞
BRPF1B和BRPF2bromodomain抑制劑(OF-1)灰色鏈霉 匹馬霉
繩狀籃狀 新生霉
檸檬兩面神 馬來酸羅酮
淺紫灰鏈霉 5-氟胞嘧啶
球孢白僵 磺嘧啶鈉
間型彎孢 磺嘧啶
金耳 磺二甲基嘧啶
芽孢桿屬 磺甲基嘧啶
假鳥腸球 氟苯尼考
就地堆肥地芽孢桿
耐鹽海桿
釀酒酵母 甲硝唑
傳染性法氏囊病病 硝酸益康唑
灰毛青霉 井岡霉
厚基肉座 硫酸巴龍霉