詳細介紹
商品介紹:
USP7-IN-1是新型USP7選擇可逆性小分子抑制劑,IC50值為33uM,對USP5、USP8、Uch-L1、Uch-L和Caspase的抑制劑弱或無(IC50>200uM),對HCT116細胞GI50值為67uM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1381291-36-6 純度:99.77% 分子量:425.91 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
USP7-IN-1 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
蠟狀芽孢桿菌Pseudomonas fluorescens大鼠過氧化物體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)
黑曲霉Pseudomonas fluorescens大鼠環孢A(CsA)
桿狀毛霉Pseudomonas fluorescens大鼠環孢A(CsA)
波氏假性阿什霉Pseudomonas fluorescens大鼠超敏C反應蛋白(hs-CRP)
三葉草根瘤菌Pseudomonas fluorescens大鼠超敏C反應蛋白(hs-CRP)
洛斯里被毛孢Pseudomonas fluorescens大鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)
金福菇Pseudomonas fluorescens大鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)
壁芽孢桿菌Pseudomonas fluorescens大鼠抗內膜抗體(EMAb)
蘇云金芽孢桿菌庫爾斯塔克亞種Pseudomonas fluorescens大鼠抗內膜抗體(EMAb)
裂褶菌Pseudomonas fluorescens大鼠低密度脂蛋白免疫復合物(LDL-IC)
釀酒酵母Pseudomonas fluorescens大鼠低密度脂蛋白免疫復合物(LDL-IC)
草木樨中華根瘤菌Pseudomonas fluorescens大鼠15脂加氧(15-LO/LOX)
平菇(PL185)Pseudomonas fluorescens大鼠15脂加氧(15-LO/LOX)
大豆慢生根瘤菌Pseudomonas fluorescens大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)
沃氏富鹽菌Pseudomonas fluorescens大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)
油菜假單胞菌Pseudomonas fluorescens大鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)
早老蛋白-1抗體苜蓿莖點霉超氧化物歧化(SOD)分型測試盒(羥胺法)
突觸后密度蛋白95抗體污黑腐皮殼總超氧化物歧化(T-SOD)比色法測試盒(羥胺法)
一種腫瘤抑制基因抗體N端禾谷鐮孢菌還原(GR)比色法測試盒
甲狀旁腺激相關蛋白抗體三隔鐮刀菌總超氧化物歧化(SOD)比色法測試盒(WST-1 法)
USP7小分子抑制劑(USP7-IN-1)威德摩爾鏈霉 硫酸葡聚糖
鴨疫里氏桿 硫酸葡聚糖
根瘤 老鸛草
根瘤 硫酸葡聚糖
黑青霉 三七皂苷R2(R型)
大腸桿 DEAE葡聚糖凝膠A-50
嗜麥芽寡養單胞 三七皂苷Ft1
無花果曲霉 DEAE葡聚糖凝膠A-25
薛瓦酵母 葡聚糖凝膠QAE-A50
長孢黃色鏈霉 麥角甾
白色中華單胞 葡聚糖凝膠QAE-A25
禾谷 SP葡聚糖凝膠C-50
產氣莢膜梭 C型 SP葡聚糖凝膠C-25
解糖鹽球 紫花前胡苷
生根根瘤 羧甲基葡聚凝膠C-50