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詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Cell Apoptosis Ethidium Bromide Detection Kit | 100T | 1～3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：
溴化乙啶（Ethidium Bromide EB）是一種DNA 結合性熒光色素，其激發波長510nm。發射波長595nm。產生桔紅色熒光。 EB 不具有膜通透性，不能透過活細胞膜，只能染死細胞，因此用EB 單染時，正常細胞不著色，早期凋亡細胞呈微弱桔紅光，晚期凋亡細胞桔紅色熒光增強。死細胞呈強桔紅光。EB 常與橙合用雙染進行凋亡檢測，與橙雙染時，正常細胞中EB 不能透膜著色，而橙可透過細胞膜，使細胞呈綠色均勻熒光，細胞圓形均勻；而在凋亡細胞中，細胞皺縮、染色質凝聚、固縮或斷裂，出芽，凋亡小體形成。染上致密濃染的黃綠色熒光，或黃綠色顆粒；而壞死細胞被EB 染成桔紅色，由此熒光顏色和細胞形態可區分出正常細胞、凋亡細胞及壞死細胞。 儲存：2-8℃，避光，有效期12個月。 |
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環。
當歸尾（標準品）英文名稱： Chromium(III) potassium sulfate, dodecahydrateFAM102B蛋白抗體包裝5g
當歸酰基戈米辛H(標準品)英文名稱： Chromium(III) sulfate, hydrateFAM104B蛋白抗體包裝100g
當歸酰基戈米辛O英文名稱： Chromotrope FB腎癌下調蛋白1抗體包裝25g
當藥苷(標準品)英文名稱： Chrysophenine凝血因子8/第八凝血因子/第八因子相關抗原抗體包裝5g
當藥黃英文名稱： Cinnamamide胎盤葉受體蛋白2抗體包裝1g
黨參（標準品）英文名稱： Cinnamon oilFAM13B1蛋白抗體包裝5g
黨參炔苷（標準品）英文名稱： Citral巖藻糖轉移8抗體包裝5g
德爾塔林(標準品)英文名稱： Citrazinic acid卵泡激結合蛋白1抗體包裝100g
燈臺葉（標準品）英文名稱： Cobalt (II) oxalate相互作用蛋白FHL2抗體包裝25g
燈心草（標準品）英文名稱： Concanamycin A脂肪去飽和1抗體包裝5g
燈心草酚英文名稱： Copper(I) bromide回腸脂肪結合蛋白抗體包裝100g
燈盞細辛(燈盞花)（標準品）英文名稱： Copper(II) acetate脂肪型脂肪結合蛋白包裝25g
地奧司明(標準品)英文名稱： Copper(II) bromide脂肪酰還原2抗體包裝250mg
地膽草（標準品）英文名稱： Copper(II) citrate, hydrate脆性X相關蛋白樣2抗體包裝50mg
地膚子（標準品）英文名稱： Copper(II) hydroxide脂肪酰解2抗體包裝100g
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規格：>99%,BR神經生長因子受體試劑盒羥基茜草;Purpurin
死谷芽孢桿菌Bacillus│vallismortis 質量規格：>99%,BR神經生長因子前體試劑盒榿木;Alnusone
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規格：>98.5%神經生長因子試劑盒喬松;Pinocembrin
溴化乙錠EB染色試劑盒大腸埃希氏桿 Sulforhodamine 101木糖基轉移Elisa
解淀粉芽孢桿 Gabapentin HCl巖藻糖糖基轉移Elisa
根癌土壤桿 Bradykinin triacetate salt生長因子受體結合蛋白2Elisa
擬枝孢鐮孢 α－內啡肽蛋白激活亞基1Elisa
葡萄汁有孢漢遜酵母 NeurotensinEB病核抗原1Elisa
復輪生小克銀漢霉 Trichostatin AEB病核抗原2Elisa
廣島鏈霉 Ala-Ala-AlaEB病衣殼抗原Elisa
釀酒酵母 α-Melanocyte stimulating hormone轉谷氨酰2Elisa
尖孢鐮孢 BRL-54443TM4SF19Elisa
平菇 Laropipran-IGFBP-4Elisa
密歇根棍狀桿標記亞種 Gabexate MesylateCT-IGFBP-4Elisa
戊糖片球 WZ811TNFSF10Elisa
Priceomyces sp. 1-Pyrenebutyric hydrazideTRIM55蛋白Elisa
阿姆斯特丹曲霉 Nutlin-3紅胰島受體酪氨酸蛋白激Elisa
枯草芽孢桿枯草亞種 URB597二羥基激2Elisa
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