詳細(xì)介紹
大鼠真皮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基說明書主要功能:
(1)血管平滑肌細(xì)胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
(2)表達(dá)鈣通道及ICAM-1和VCAM-1,參與血管壁的炎癥反應(yīng)。
(3)與血管疾病的進(jìn)展和穩(wěn)定有關(guān)。
產(chǎn)品名稱:大鼠真皮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基說明書
英文名稱:The rat dermal fibroblasts into the medium
規(guī)格:5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號(hào):GOY-X0397
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公司向您推薦細(xì)胞的詳細(xì)說明:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
大鼠真皮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基說明書 | The rat dermal fibroblasts into the medium | 5×105cells/瓶 |
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
36700-45-596T分泌性白細(xì)胞蛋白酶抑制因子(SLPI)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
1603-47-096T谷胱甘肽還原酶(GR)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
110011-77-396T前膠原C端蛋白酶增強(qiáng)子1(PCPE1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
7437-55-096T穿孔素1(PRF1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
19716-61-196TcAMP應(yīng)答元件結(jié)合蛋白(CREB)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
1167424-32-996T微管關(guān)聯(lián)蛋白4(MAP4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
1167424-31-896T胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素(TSLP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
91421-43-196T蛋白酪氨酸磷酸酶受體O(PTPRO)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
3-氟-4-苯乙
對(duì)亞甲苯雙(化三苯基膦)
對(duì)亞甲苯雙(化三苯基膦)
氘代硫酸甲酯
水合高酸鐵
水合高酸鐵
埃博霉素B
2--4-氟芐
2--4-氟芐
2--4-氟芐
基本特性:
(1)組織來源于正常大鼠大動(dòng)脈組織。
(2)鑒定:肌動(dòng)蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
(3)原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
(4)每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù):>5×105 cells/1ml。
(5)肌動(dòng)蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗(yàn)證。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
培養(yǎng)操作:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取
生理變化:
(1)主動(dòng)脈硬化。
(2)主動(dòng)脈瘤
(3)主動(dòng)脈鈣化。